[发明专利]重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化无效
申请号: | 03129330.1 | 申请日: | 2003-06-18 |
公开(公告)号: | CN1566346A | 公开(公告)日: | 2005-01-19 |
发明(设计)人: | 姜卫红;杨晟;俞浩;谢幼华;汪垣;杨勇;张伟;郑华宝 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | C12N15/52 | 分类号: | C12N15/52;C12N15/62;C07K19/00;C07K14/165 |
代理公司: | 上海专利商标事务所 | 代理人: | 徐迅 |
地址: | 20003*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化。SARS病毒S蛋白基因被分段和完整地克隆到不同的细菌表达载体进行了表达。S蛋白基因751-1925bp、2005-3410bp、1-1925bp、32-3659bp片段及全长1-3768bp DNA都在大肠杆菌中实现了高效表达,表达量分别占菌体蛋白的35%、34%、24%、17%和5%,并经亲和层析得到了纯化。用本发明方法制备的重组S蛋白可用于临床诊治,疫苗制备和结构生物学研究。 | ||
搜索关键词: | 重组 sars 冠状病毒 蛋白 表达 分离 纯化 | ||
【主权项】:
1.一种制备重组SARS冠状病毒S蛋白或片段的方法,其特征在于,该方法包括步骤:(a)提供编码SARS冠状病毒S蛋白或片段的核苷酸序列,其中所述的核苷酸序列含有SEQ ID NO:1中第751-1925位、2005-3410位、1-1925位、32-3659位或全长1-3768位的核苷酸序列;(b)将步骤(a)中的核苷酸序列插入表达载体;(c)将步骤(b)的表达载体转化宿主细胞,获得转化的宿主细胞;(d)在表达条件下,培养步骤(c)所述的宿主细胞,从而表达SARS冠状病毒S蛋白或片段;(e)分离纯化步骤(d)的SARS冠状病毒S蛋白或片段。
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