[发明专利]基因靶向序列盒无效
| 申请号： | 03130405.2 | 申请日： | 2003-07-15 |
| 公开（公告）号： | CN1539988A | 公开（公告）日： | 2004-10-27 |
| 发明（设计）人： | 曹又佳;张翠竹 | 申请（专利权）人： | 南开大学 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12N15/12;A61K48/00 |
| 代理公司： | 天津三元专利商标代理有限责任公司 | 代理人： | 胡婉明 |
| 地址： | 300071天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供一种基因靶向序列盒，其包括内部核糖体进入位点(IRES)引导的抗药性标记基因区和两端的同向LoxP序列：LoxP－IRES－Neor－PolyA－LoxP，该片段的上游端和下游端分别连接多个克隆酶切位点，以闭环质粒形式存在，其以pLP－IRESneo(Clontech，USA)为模板，通过多聚酶链式反应(PCR)扩增基因片段IRES－Neor－PolyA成5’端LoxP序列，退火成双链DNA片段并连接构成YC－Neo序列盒，使在体细胞中进行同源基因靶向重组和基因敲出成为可能；该序列盒还可设计为LoxP－IRES－GFP－IRES－Neor－PolyA－LoxP，即在YC－Neo序列盒的基础上，增加了荧光蛋白的编码序列，构成YC－GN序列盒，可用荧光强度为指标进一步富集正确的重组子，上述序列盒的设计巧妙合理，方便实用，填补国际国内基因修饰载体构建领域的空白。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 靶向 序列 | ||
【主权项】：
1、一种基因靶向序列盒，其特征在于，其包括内部核糖体进入位点引导的抗药性标记基因区和两端的同向LoxP序列：LoxP-IRES-Neor-PolyA-LoxP，该片段的上游端和下游端分别连接多个克隆酶切位点，以闭环质粒形式存在。
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