[发明专利]家畜口蹄疫病毒A、O型基因工程双价多肽疫苗及其制备方法

摘要

涉及一种家畜口蹄疫病毒和双价多肽疫苗以及遗传工程领域，尤其是一种A、O型基因工程双价多肽疫苗及其制备方法。克隆了A、O型口蹄疫病毒VP1的抗原决定簇，将其串联与能显著提高其免疫原性的大片段相连后，插入原核表达载体，诱导表达的蛋白经纯化后制成具有口蹄疫A、O型免疫原性的双价多肽疫苗。其制备方法为在湿菌加缓冲液，离心，收集上清；将平衡的Ni⁺－NTA－Sepharose 6B加至上清中，将凝胶装到层析柱上；用缓冲液洗脱；收集，用SDS－PAGE分析；再作SDS－PAGE分析。能同时有效地预防A、O型口蹄疫病毒，安全可靠。

主权项

1、家畜口蹄疫病毒A、O型基因工程双价多肽疫苗，其特征在于其核苷酸序列为：1 GGATCCATGGCTGTGCCAAACTTGCGTGGCGATTTGCAGGTGTTGGCTCAGAAAGTGGCT61 CGTACTTTGCCAGAGCTCCGATCGCGTCATAAACAGAAAATTGTGGCTCCAGTGAAACAG121 ACTTTGGAATTCGGCTCTGGCCGTCGTGGCGATATGGGCTCTTTGGCTGCTCGTGTGGTG181 AAACAGTTGCCAGGTACCGTCGACATGGACATTGACCCGTATAAAGAATTTGGAGCTTCT241 GTGGAGTTACTCTCTTTTTTGCCTTCTGACTTCTTTCCTTCTATTCGAGATCTCCTCGAC301 ACCGCCTCTGCTCTGTATCGGGAGGCCTTAGAGTCTCCGGAACATTGTTCACCTCACCAT361 ACAGCACTCAGGCAAGCTATTCTGTGTTGGGGTGAGTTGATGAATCTGGCCACCTGGGTG421 GGAAGTAATTTGGAAGACCCAGCAGTCGACGCAGTTCCAAACTTGCGTGGTGATTTGCAG 482 GTTTTGGCACAGAAAGTTGCTCGTACCTTGCCAGGCTCTGGCCGTCGTGGCGATATGGGC 542 TCTTTGGCTGCTCGTGTGGTGAAACAGTTGCCACTCGAGTCCAGGGAATTAGTAGTCAGC601 TATGTCAATGTTATGGGCCTAAAAATCAGACAACTACTGTGGTTTCACATTTCCTGTCTT661 ACTTTTGGAAGAGAAACTGTTCTTGAGTATTTGGTGTCTTTTGGAGTGTGGATTCGCACT721 CCTCCTGCTTACAGACCACCAAATGCCCCTATCTTATCAACACTTCCGGAAACTACTGTT781 GTTAGACGACGAGGCAGGTCCCCTAGAAGAAGAACTCCCTCGCCTCGCAGACGAAGGTCT841 CAATCGCCGCGTCGCAGAAGATCTCAATCTCGGGAATCTCAATGTTAGAAGCTT其中7～72，85～126，451～513为VP1蛋白的O型抗原决定簇；133～192，514～573为VP1蛋白的A型抗原决定簇；205～450，574～894为有利于FMDV多肽疫苗形成一定空间结构的载体蛋白；其他序列为连接片段。