[发明专利]多色荧光物复合扩增STR引物设计方法

摘要

一种多色荧光物复合扩增STR的引物设计方法，其特征是以公共的一条短引物YPA′与四条在5′端分别加有荧光标记物F1、F2、F3、F4的短引物YPB1′、YPB2′、YPB3′、YPB4′之一构成短引物对；分别在能够与人类基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上一段非人类的基因组序列构成与短引物对配合使用的长引物对。与现有技术相比较，本发明所设计的引物可以在同一反应体系中同时对16个不同的基因座进行扩增，各短引物的结构相似，每条引物间只相差5个碱基，总的短引物数目仅为5条，引物间相互的反应的可能性相对较小，有利于复合PCR的进行，从而能够高效率地大量扩增目的基因片段，实验结果的可重现性极高。

主权项

1、一种多色荧光物复合扩增STR引物设计方法，其特征是以公共的一条短引物YPA′YPA′(5′--GTTCTT-ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)，与以下四条在5′端分别加有荧光标记物F1、F2、F3、F4的短引物YPB1′、YPB2′、YPB3′、YPB4′之一构成短引物对：YPB1′(5′--F1-TAATACGACTCACTATAGGGAGAC-3′)YPB2′(5′--F2-TAATACGACTCAGTATAGGGACAG-3′)YPB3′(5′--F3-TAATACGACTCAATATAGGGATAA-3′)YPB4′(5′--F4-TAATACGACTCATTATAGGGAAAT-3′)；分别在能够与人类基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上一段非人类的基因组序列：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB1(5′--TAATACGACTCACTATAGGGAGAC-3′)构成与短引物对YPA′、YPB1′配合使用的长引物对YPA-P1和YPB1-P2；分别在能够与人类基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上一段非人类的基因组序列：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB2(5′--TAATACGACTCAGTATAGGGACAG-3′)构成与短引物对YPA′、YPB2′配合使用的长引物对YPA-P1和YPB2-P2；分别在能够与人类基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上一段非人类的基因组序列：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB3(5′--TAATACGACTCAATATAGGGATAA-3′)构成与短引物对YPA′、YPB3′配合使用的长引物对YPA-P1和YPB3-P2；分别在能够与人类基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上一段非人类的基因组序列：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB4(5′--TAATACGACTCATTATAGGGAAAT-3′)构成与短引物对YPA′、YPB4′配合使用的长引物对YPA-P1和YPB4-P2。