[发明专利]灰树花多糖产品中活性多糖含量的测定方法

摘要

本发明公开一种灰树花多糖产品中具有生物活性的水溶性多糖含量的测定方法，其方法包括脂溶性成分除去，可溶性糖类干扰物质除去，硫酸－苯酚法测定活性多糖含量等步骤。本发明的方法具有可操作性强、测定结果稳定可靠、测定结果的变异系数小、误差小、重现性高等优点。

主权项

1.一种灰树花多糖产品中活性多糖含量的测定方法，由以下步骤组成：1)除去脂溶性成分：取烘干磨碎的待测多糖样品，分别称0.5～2克于6个离心杯中，分别加入30ml乙醚，充分振荡5～15分钟，以4000～5000转/分钟离心5～10分钟，弃去上清液，再加入30ml乙醚，如此重复离心3次；2)除去可溶性糖类干扰物质：向上述弃去上清液后的离心杯中加入50～60℃的80％乙醇30ml，充分振荡5～15分钟，以4000～5000转/分钟离心5～10分钟，弃去上清液，如此重复离心3次；然后再向弃去上清液后的离心杯中加入40～50℃蒸馏水30ml，在40～50℃恒温水浴中振荡60分钟，以4000～5000转/分钟离心5～10分钟，收集上清液，再以此方法重复离心3次，上清液均收集于容量瓶中；定容至100～250ml，用作活性多糖待测溶液；3)硫酸-苯酚法测定活性多糖含量：吸取多糖待测溶液5～25ml，用蒸馏水稀释至50～300ml，吸取该稀释定溶液1～2ml，分别加于6个25ml比色管中，依次加入蒸馏水补至总体积为2.0ml，再分别加入5％苯酚1.0ml，浓硫酸5.0ml，然后迅速放入沸水浴中12～18分钟，再迅速冷却至25～30℃，用蒸馏水定容至10ml，摇匀、冷却后以空白样品为参比，在485nm波长下，1cm比色皿测定光密度，根据标准曲线得出待测液中多糖的质量。