[发明专利]一种快速测定糖化酶活力的方法

摘要

本发明公开了一种快速测定糖化酶活力的方法，该方法根据酶促反应生成过氧化氢量与糖化酶作用于糊精产生的葡萄糖量成正比这一原理，设计的测定系统的反应池腔侧面装有过氧化氢电极，电极表面为固定化的葡萄糖氧化酶膜，反应池腔设有电磁搅拌器，底物和样品通过进样口加入，光控进样传感器检测加样动作，缓冲液通过缓冲液泵进入反应池腔，通过锥形溢流帽流入废液腔并经废液泵排出；测定系统的二次仪表具有信号采集与放大、A/D转换、清洗、搅拌、数据贮存和结果打印等功能，通过定标和线性校正操作，仪器可直接得到糖化酶的活力单位。本发明建立的方法专一性好、结果可靠、操作简单，在3分钟之内即可完成测定，用于生产过程的监控十分有效。

主权项

1、一种快速测定糖化酶活力的方法，其特征在于根据这一反应过程，在葡萄糖氧化酶活力不变，并且糊精过量的条件下，一定时间内H₂O₂的生成量与糖化酶的活力成正比，利用这一原理，设定的测定系统中反应池腔(4)侧面装有过氧化氢电极(6)，电极表面为固定化的葡萄糖氧化酶膜圈(5)，反应池腔(4)中有搅拌子(9)通过磁力搅拌器(10)使参与反应的糊精和糖化酶充分混匀，糊精底物和糖化酶通过进样口(1)加入到反应池内，光控进样传感器(2)检测到底物和糖化酶的加入，控制测定程序运行，反应结束后仪器自动完成清洗，缓冲液从缓冲液入口(14)通过连接管道，经缓冲液泵(11)进入反应池腔(4)，多余液体从锥形溢流帽(15)排出进入废液腔(3)，最后通过废液泵(12)经废液出口(13)排出；测定系统的二次仪表是用单片机作中央控制器，控制采样、信号放大、A/D转换、清洗、搅拌、数据贮存和结果打印等功能；系统通过测定H₂O₂电极对已知活力的葡萄糖糖化酶的响应电流进行定标和线性校正，在测定糖化酶样品时通过校正运算，直接得到样品的糖化酶活力单位。