[发明专利]重组人IA-2抗原的制备方法无效
申请号: | 03141675.6 | 申请日: | 2003-07-17 |
公开(公告)号: | CN1490332A | 公开(公告)日: | 2004-04-21 |
发明(设计)人: | 罗敏 | 申请(专利权)人: | 上海市内分泌代谢病研究所 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/12;C12P19/34;C12P21/00 |
代理公司: | 上海东方易知识产权事务所 | 代理人: | 许瑞德 |
地址: | 20002*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 重组人IA-2抗原的制备方法,包括从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现PinpointXa-IA-2表达型重组质粒的构建;将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白,可以直接作为抗原,用于IA-2抗体的链亲和素固相酶免检测技术。 | ||
搜索关键词: | 重组 ia 抗原 制备 方法 | ||
【主权项】:
1、重组人IA-2抗原的制备方法,包括步骤1:IA-2表达型重组质粒的构建;步骤2:IA-2重组蛋白的诱导表达;步骤3:IA-2重组蛋白的分离、亲和层析和透析纯化;其特征在于:所述的步骤1是从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现Pinpoint Xa-IA-2表达型重组质粒的构建;所述的步骤2是将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;所述的步骤3是将IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白。
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