[发明专利]一种快速筛选葫芦科RIP新基因的方法无效
申请号: | 03144024.X | 申请日: | 2003-07-26 |
公开(公告)号: | CN1482259A | 公开(公告)日: | 2004-03-17 |
发明(设计)人: | 林奇英;林毅;吴祖建;谢联辉 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学;福州腾龙生物有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 350002福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及一种快速筛选葫芦科RIP基因的方法,即根据已知的葫芦科RIP氨基酸序列上、下游两段高度保守的氨基酸序列及其密码子偏好设计简并引物对LY1/LY2,以总DNA为模板进行Touchdown-PCR扩增,对未报道过RIP基因的葫芦科植物,直接将PCR产物克隆测序,即可获得新的RIP基因;对已报道过RIP基因的葫芦科植物,根据RIP基因LY1/LY2区段的限制性片段长度多态性,可快速区分已知和未知的RIP基因;可克服以前先分离RIP后克隆其基因方法的目的性差、费工、费时的不足,具有筛选快速、准确等特点,广泛应用于RIP基因的筛选。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 筛选 葫芦 rip 基因 方法 | ||
【主权项】:
1、一种RIP基因快速筛选的方法:根据已知的葫芦科RIP蛋白氨基酸序列上、下游两段高度保守的氨基酸序列及其密码子偏好设计简并引物对LY1/LY2,以总DNA为模板进行Touchdown-PCR扩增。对未报道过RIP基因的葫芦科植物,直接将PCR产物克隆测序,即可获得新的RIP基因;对已报道有RIP基因的葫芦科植物,根据RIP基因LY1/LY2区段的限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP),可快速区分已知的RIP基因和未知的RIP基因。
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