[发明专利]黄藤无性系组培繁殖方法

摘要

本发明涉及：黄藤无性系组培繁殖方法，其特点是：1)萌蘖芽外植体的采集，在采集萌蘖芽外植体的过程中防止芽体外伤和芽心的震裂，并使萌蘖芽外植体的高度为15－40cm；2)外植体的消毒，采用两次消毒法，首先，用洗衣粉将外植体清洗干净，第二步：用0.1％升汞消毒1－2分钟，无菌水漂洗3次；3)防止褐变，采用半光氨酸或抗坏血酸溶液泡洗前述萌蘖芽外植体；4)丛芽诱导与继代增殖；5)生根培养，高度大于2cm的芽苗最为适合生根培养。本方法以萌蘖芽做外植体，可以繁殖经过选育和测定的优良无性系，生产的是良种的苗木，具有强大的市场竞争力，因而本技术具有广阔的应用前景，可产生巨大的经济效益。

主权项

1、黄藤无性系组培繁殖方法，其特征是：1)萌蘖芽外植体的采集，在采集萌蘖芽外植体的过程中防止芽体外伤和芽心的震裂，并使萌蘖芽外植体的高度为15-40cm；2)外植体的消毒，采用两次消毒法，首先，用洗衣粉将外植体清洗干净，剥去1-2层叶鞘，用75％酒精消毒15-20秒，0.1％升汞消毒8-10分钟，无菌水漂洗1次5分钟，第二步：剥去多余叶鞘并修剪至适合于培养的大小，即萌蘖芽外植体3-4cm长、顶芽外植体5-6cm长，再用0.1％升汞消毒1-2分钟，无菌水漂洗3次，分别为5分钟、5分钟、10分钟；3)防止褐变，采用半光氨酸或抗坏血酸溶液泡洗前述萌蘖芽外植体，或采用半光氨酸或抗坏血酸混合溶液泡洗前述萌蘖芽外植体，可以有效地抑制芽外植体的褐变，所述的半光氨酸和抗坏血酸的浓度分别为2mg/l和10mg/l；4)丛芽诱导与继代增殖，丛芽诱导和继代增殖的培养基配方为：KNO3、NH4NO3、CaCl2、MgSO4和KH2PO4，其配比分别为：1.5MS、0.5MS、1.0MS、1.0MS、2.5MS；丛芽诱导周期35～40天，继代培养的周期为45～50天；5)生根培养，高度大于2cm的芽苗最为适合生根培养，生根培养基为1.0mg/L NAA+2.0mg/L IBA+0.33MS大量元素+20.g/L蔗糖溶液+1.0MS微量元素+1.0MS维生素和氨基酸，生根培养的时间需要50～60天，对未生根的芽苗除去外层叶鞘后，进行第二次生根培养。