[发明专利]蒟蒻薯的离体快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种蒟蒻薯的快速繁殖方法，该方法包括以下五个步骤：(1)引种；(2)无菌外植体的获得；(3)芽的诱导及增殖；(4)根的诱导及培养；(5)试管苗的移栽。利用本方法较好地使这类濒危的蒟蒻薯的种群得以扩大，进行其优良种苗规模生产，从而在保护珍贵植物资源的基础上使其得到开发与利用。

主权项

1、一种蒟蒻薯的快速繁殖方法，依次由以下几个步骤组成：第一步、引种将从云南引入的蒟蒻薯成株剪去叶留根状茎、根带回，置于遮阴度为80～90％的荫棚中，种植在塘泥∶泥碳土∶粗沙＝6∶3∶1的基质中，保持空气的湿度在80％以上；第二步、无菌外植体的获得种子的无菌实生苗的获得可以通过无菌播种来得到；种子的无菌播种有以下两种方法：(1)室内无菌播种种子从母株采后马上用自来水冲洗，70％酒精处理10～15s，无菌水冲洗3～5次，再用0.1％升汞消毒3-5min，无菌水冲洗5次后接种，黑暗培养，温度保持在25～30℃；(2)室外播种种子从母株采后马上用自来水冲洗，用点播的方式播到泥碳土中，置遮荫度为80～90％的荫棚中，保持泥碳土湿润，空气的相对湿度保持在80％以上；第三步、芽的诱导及增殖芽的诱导与增殖主要从无菌实生苗开始，当无菌实生苗长高到1.5～2.0cm时，将茎尖切下，接种到培养基中培养，开始第一、二代培养时，茎尖基部膨大，颜色开始转为淡黄色，并长出白色到淡黄色的小芽，从第三代起，开始抽出绿色叶片，在叶片抽出后的第二或三代，幼叶强烈诱导出直径约0.1～0.2cm的白色小芽，将这些小芽接到培养基中，约30～35天，这些小芽均长成直径约0.3～0.5cm、高约1.5cm、带1～2片叶的适宜生根的壮芽；第四步、根的诱导与培养将步骤3中得到的直径大于0.3mm的丛芽接种到含NAA、IBA的1/2MS中，再接到培养基中培养，30～35天后植株基部即会长出粗壮新根；第五步、试管苗的移栽把即将移植的试管苗置于培养室外或即将移栽的荫棚内炼苗10～15天，洗净试管苗附着的培养基，种植到河沙∶泥碳土＝6∶4的基质中，苗床需遮荫90％，保持空气湿度80％以上，温度保持在22～30℃，移栽后每3天喷施1/2MS营养液。