[发明专利]一种构建人载脂蛋白AIm表达基因的制备方法有效
| 申请号： | 03150703.4 | 申请日： | 2003-09-01 |
| 公开（公告）号： | CN1519321A | 公开（公告）日： | 2004-08-11 |
| 发明（设计）人： | 龚邦强;丁满生;张梅芳 | 申请（专利权）人： | 上海凯曼生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/63;C12P21/00 |
| 代理公司： | 上海开祺专利代理有限公司 | 代理人： | 费开逵 |
| 地址： | 200233上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种构建人载脂蛋白AImilano表达基因的制备方法。该方法采用PCR引物制成pro－ApoAIm的基因，构建表达基因PET12a/PAPOAIm重组质粒再进行工程菌的构建，然后构建的工程菌在一定的发酵条件下发酵，进行pApoAIm的蛋白纯化，纯化的蛋白再制成pro－ApoAIm蛋白二聚体形式。本方法具有pro－ApoAIm比ApoAIm性质更稳定，在大肠杆菌表达体系中采用T7启动子表达载体pET12a，用IPTG诱导目的蛋白的生产，产生蛋白是包涵体，它能有效防止蛋白水解酶对异源蛋白的水解等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 脂蛋白 ai sub 表达 基因 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种获得高活性的人载脂蛋白pro-ApoAIm的制备方法由下列步骤组成：a、设计pApoAIm PCR引物核苷酸序列制成pro-ApoAIm基因；b、构建表达基因PET12a/PApOAIm重组质粒；c、工程菌构建；d、构建的工程发酵；e、pro-ApoAIm蛋白的纯化；f、pro-ApoAIm蛋白二聚体的制备。
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