[发明专利]耐盐性番茄植株培育方法

摘要

一种耐盐性番茄植株培育方法，取无菌苗下胚轴作为外植体，接种培养，将继代2次的愈伤组织培养物接种于附加1/3人工复配海水的培养基中，再将呈绿色的愈伤组织接种于无海水的培养基，继代7～8代后转入附加1/3和1/2人工复配海水的培养基，以建立耐盐细胞系，再将已证明耐盐的愈伤组织转至不含海水的分化培养基上，得到再生苗盆栽后用1/3人工复配海水作为灌溉水，进行耐盐性筛选，获得耐盐植株。本发明与现代基因工程育种相比，具有成本低、技术易掌握、安全性隐患低等明显的优点。

主权项

1、一种耐盐性番茄植株培育方法，其特征在于包括：1)无菌苗体系的建立：种子浸种24小时，表面消毒后用无菌水冲洗，在无菌条件下萌动48小时后，接种于1/2MS培养基上获得无菌苗；2)耐盐细胞系的建立：苗龄10～12天时，取其下胚轴作为外植体，接种于MS+苄基腺嘌呤2.0mg/L+吲哚乙酸0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5-7.0g/L的培养基上，在25±1℃，光强25μmol.m-2.s-1，14小时光/10小时暗的光周期下培养，每15天继代1次，将继代2次的愈伤组织培养物接种于附加1/3人工复配海水的培养基中，每升全浓度人工海水组成为CaCl2510mg、MgCl23420mg、MgSO42100mg、KCl750mg和NaCl26.75mg，20天后，将呈绿色的愈伤组织接种于无海水的培养基，继代7～8代后，再转入附加1/3人工复配海水和1/2人工复配海水的培养基，以建立耐1/3人工复配海水和耐1/2人工复配海水的细胞系；3)耐盐植株的获得：将上述培养基上仍然存活的已证明耐盐的愈伤组织转至不含海水的分化培养基上，得到再生苗，再生小苗盆栽，并用1/3人工复配海水作为灌溉水，进行耐盐性筛选，获得耐盐植株；4)耐盐植株的分子验证：将获得的番茄植株用扩增片段长度多态性分子标记证实在DNA水平上发生了突变。