[发明专利]白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法有效

专利信息
申请号: 03152968.2 申请日: 2003-09-05
公开(公告)号: CN1493687A 公开(公告)日: 2004-05-05
发明(设计)人: 田志刚;张建;魏海明;张建华;孙汭 申请(专利权)人: 中国科学技术大学;山东省医学科学院基础医学研究所
主分类号: C12N5/08 分类号: C12N5/08;C12N15/79
代理公司: 合肥华信专利商标事务所 代理人: 余成俊
地址: 230026*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明公开了一种白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法,该细胞株表型为CD56强阳性,CD16和CD3均为阴性,其形态为分散的、半贴壁生长状态。其制备方法,是将IL-15的cDNA编码区插入pcDNA3真核表达载体,构建分泌型重组真核表达载体pcDNA3/IL-15;利用脂质体转染NK-92细胞;在筛选培养基中加入Geneticin(G418)进行筛选;有限稀释克隆化细胞,以IL-15的依赖细胞株测定克隆细胞培养上清中IL-15的活性,从中挑选出表达IL-15的阳性细胞克隆;将该克隆在20~100活性单位的IL-15的完全α-MEM培养基中进行扩增,得到具有临床应用价值的工程细胞株。适于临床用于过继免疫治疗肿瘤。
搜索关键词: 白细胞 15 基因 修饰 自然 杀伤 细胞株 及其 制备 方法
【主权项】:
1、白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株,其表型为CD56强阳性,CD16和CD3均为阴性,其特征在于形态为分散的、半贴壁生长状态。
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