[发明专利]黑曲霉菊粉内切酶基因和表达该基因的重组毕赤酵母菌株无效
| 申请号： | 03153636.0 | 申请日： | 2003-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN1594542A | 公开（公告）日： | 2005-03-16 |
| 发明（设计）人： | 王建华;滕达;姚怡;杨雅麟;张帆 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院饲料研究所;王建华 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/24;//;C12R1∶685;1∶84) |
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| 地址： | 100081北京市中关村*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明筛选到产菊粉内切酶的黑曲霉(Aspergillus niger)9891CGMCC NO：0991，从中克隆出菊粉内切酶基因，对目的基因片段进行测序分析，不含信号肽的基因开放读码框长1485bp，编码509个氨基酸，该蛋白计算分子量约为55.9KD，该基因与近年报道的及几例真菌菊粉内切酶基因作同源性分析发现：与黑曲霉(Ohtak.et al，1998)，Aspergillus ficuum(Uhm，t.，et al，1998)菊粉内切酶基因同源性分别为92％和95％。将不带有DNA原基因信号肽编码序列的菊粉内切酶基因插入到毕赤酵母表达载体上，构建重组表达载体，用于转化毕赤酵母得到了重组子，该基因在毕赤酵母中实现了分泌表达，表达产物具有功能性。试管水平初筛结果表明：优秀重组子I3－50比出发菌株内切菊粉酶活性(以蔗糖作为底物)表达量高84倍。将重组酵母进行诱导发酵，对重组酶进行酶学性质分析表明，最适反应pH约5.5，最适反应温度约55℃。 | ||
| 搜索关键词： | 曲霉 菊粉 内切酶 基因 表达 重组 酵母 菌株 | ||
【主权项】：
1.一种高产菊粉内切酶的黑曲霉菌株(Aspergillus niger)9891 CGMCCNO：0991。
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