[发明专利]用于多重PCR条件优化的方法和组分

摘要

本发明属于PCR领域。尤其是，本发明提供了用于多重PCR引物优化的方法，组分和试剂盒，也就是，处于不同浓度比值的大量的5’和3’特异性引物以及5’和3’通用引物。

主权项

1.一种用于优化多重PCR引物的方法，该方法包括：a)提供了大量的5’和3’特异性引物，每一个所述的特异性引物均包括一段与将要扩增的目标序列互补的特异性序列以及一个通用序列。b)提供一个5’通用引物和一个3’通用引物，所述的5’通用引物的序列与5’特异性引物上的通用部分序列相同，所述的3’通用引物的序列与3’特异性引物上的通用部分序列相同；c)针对大量的模板，利用通用引物以及大量的所述的5’特异性引物和3’特异性引物进行多重PCR.在每一个所述的多重PCR中，所述的5’通用引物和3’通用引物在反应体系中的终浓度等于或高于相应的所述的5’和3’特异性引物的浓度，特异性引物在不同的多重PCR反应体系的浓度亦不相同。d)分析所述的不同的多重PCR的产物，鉴别出一个多种目标序列均获得了相当扩增的多重PCR，从而确定用于目标序列扩增的最有的多重PCR引物组合。