[发明专利]在蛋白质如病原性/传染性蛋白质中诱导构象转变的方法

摘要

本发明涉及一种在蛋白质中诱导构象转变的体外方法，而所述构象转变导致β折叠二级结构的含量升高，该方法包括步骤：a)提供一种转变缓冲液；b)向转变缓冲液中加入含有带负电荷脂质的层状脂质结构的溶液；c)向转变缓冲液中加入蛋白质分子；d)由转变缓冲液、添加的脂质和蛋白质分子形成一种样品混合物；e)在样品混合物中确定转变温度；和f)将步骤d)的样品混合物置于根据步骤e)的转变温度下足够的时间以形成构象转变的蛋白质。通过这一方法，形成了层状脂质结构和构象转变蛋白质的水溶性复合物，所述构象转变的蛋白质为寡聚的β折叠中间型结构。可以通过有效地破坏层状脂质结构由层状脂质结构和寡聚的β折叠中间型结构的水溶性复合物产生淀粉样聚集物。这类蛋白质可能涉及神经变性疾病像传播性海绵状脑病(TSE)、阿尔茨海默症、多发性硬化症和帕金森病。说明书包括通过该方法生产的蛋白质的应用，例如，开发PrPC向PrP^Sc转变的不同相；开发新的用于诊断的TSE检测方法以及抗TSE如人克－雅氏病的潜在的治疗方法和预防方法。

主权项

1.一种在重组蛋白质和/或其变体中诱导构象转变的体外方法，其中所述的构象转变导致β折叠二级结构含量的增加，该方法包括步骤：a)提供一种转变缓冲液；b)向转变缓冲液中加入含有带负电荷脂质的层状脂质结构的溶液；c)向转变缓冲液中加入重组的蛋白质分子和/或其变体；d)由转变缓冲液、添加的脂质和蛋白质分子形成一种样品混合物；e)在样品混合物中确定转变温度；和将步骤d)的样品混合物置于根据步骤e)的转变温度下足够的时间以形成构象转变的蛋白质；其中形成层状脂质结构和构象转变的蛋白质的水溶性复合物，构象转变的蛋白质为寡聚的β折叠中间态结构。