[发明专利]用于胰岛素产生细胞的方法、组合物及生长与分化因子

摘要

本发明公开了一种使分化的非激素产生胰细胞转化为分化的激素产生细胞的方法。该方法包括两个步骤：第一，在使所述分化的非激素产生细胞转化干细胞的条件下培养细胞；和第二，在为使干细胞分化为激素产生细胞而提供的条件下培养干细胞。本发明表明了呈现给所述干细胞以导致它们分化为激素产生细胞，特别是胰岛素产生细胞的生长和分化因子。本发明提供了一种大量激素产生细胞例如胰岛素产生细胞的新来源，这些细胞目前在治疗性应用例如糖尿病的治疗中不能得到。

主权项

1.一种使分化的非激素产生胰细胞转化为分化的激素产生细胞的方法，该方法包括：a)在一定条件下，在第一细胞培养系统中用第一细胞培养基培养所述分化的非激素产生胰细胞，所述第一细胞培养基包含基础培养基，有或无血清，以及有或无生长因子，在该条件下所述分化的非激素产生胰细胞转化为干细胞；和b)在一定条件下，在第二细胞培养系统中用第二细胞培养基培养所述干细胞，在该条件下所述干细胞分化为激素产生细胞，所述第二细胞培养基包含选自A组的至少一种化合物和选自B组的至少一种化合物，其中A组的化合物选自：β动物纤维素、活化素A、BMP-2、TGF-βSRII、DMSO、Sonic Hedgehog、层粘连蛋白、甲硫氨酸-脑啡肽、DMF和霍乱毒素A；其中B组的化合物选自：活化素A、心房肽、β动物纤维素、骨形态发生蛋白(BMP-2)、骨形态发生蛋白(BMP-4)、C钠尿肽(CNP)、雨蛙肽、降钙素基因相关肽(CGRP-α)、缩胆囊素(CCK8-酰胺)、缩胆囊素八肽(硫酸化CCK8)、霍乱毒素B亚单位、皮质酮(Reichstein’s物质H)、地塞米松、DIF-1、Differanisole A、二甲亚砜(DMSO)、EGF、内皮缩血管肽1、Exendin 4、酸式FGF、FGF2、FGF7、FGFb、胃泌素I、胃泌素释放肽(GRP)、胰高血糖素样肽1(GLP-1)、葡萄糖、生长激素、肝细胞生长因子(HGF)、IGF-1、IGF-2、胰岛素、KGF、催乳激素、层粘连蛋白、亮氨酸-脑啡肽、白血病抑制因子(LIF)、甲硫氨酸-脑啡肽、正丁酸、神经生长因子(β-NGF)、烟酰胺、n-n-二甲基甲酰胺(DMF)、甲状旁腺素释放肽(Pth II RP)、PDGF AA+PDGF BB混合物、PIGF(胎盘GF)、孕酮、促乳素、腐胺二氢氯化物γ照射的细胞培养物、REG1、视黄酸、硒、亚硒酸、Sonic Hedgehog、大豆胰蛋白酶抑制剂、P物质、超氧化物歧化酶(SOD)、TGF-α、TGF-βsRII、TGF-β1、运铁蛋白、三碘甲腺原氨酸(T3)、Trolox、血管活性肠肽(VIP)、VEGF、维生素A和维生素E。