[发明专利]以密码子翻译效率为基础的基因表达系统

摘要

本法明揭示调节CHO细胞中从多核苷酸生成蛋白的方法，通过用同义密码子取代至少1个多核苷酸的密码子，同义密码子在CHO细胞中的翻译效率高于或低于它取代的密码子，或通过将编码同工tRNA的多核苷酸导入CHO细胞，同工tRNA限制多肽生成速度且对应于第1个多核苷酸的密码子。本发明也揭示使用编码蛋白的多核苷酸，修改其密码子组成以提高CHO细胞中的蛋白生成。

主权项

1.一种构建合成多核苷酸的方法，在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中从合成多核苷酸生成多肽的水平不同于从编码相同多肽的亲代多核苷酸生成的水平，其特征在于，所述方法包括：-选择亲代多核苷酸的第1个密码子用于同义密码子取代，其中选择同义密码子的基础是它在CHO细胞中的翻译效率不同于第1个密码子，这是比较密码子在测试CHO细胞中的翻译效率；和-用同义密码子取代第1个密码子以构建合成多核苷酸，其中，密码子翻译效率的比较示于表1： 表1 密码子 翻译效率 密码子 翻译效率 密码子 翻译效率 AlaGCA 38 GlyGGA 60 ProCCC 70 AlaGCG 28 GlyGGG 18 ProCCT 63 AlaGCT 18 GlyGGC 12 ProCCG 60 AlaGCC 14 GlyGGT 6 ProCCA 56 ArgAGA 36 HisCAC 32 SerAGC 72 ArgCGA 34 HisCAT 27 SerTCT 69 ArgCGG 35 SerAGT 65 ArgCGT 33 IleATC 8 SerTCG 58 ArgAGG 29 IleATT 6 SerTCA 58 ArgCGC 19 IleATA 6 SerTCC 55 AsnAAC 40 LeuCTC 45 ThrACA 47 AsnAAT 33 LeuTTG 34 ThrACG 47 LeuCTA 25 ThrACT 45 AspGAT 27 LeuCTG 20 ThrACC 28 AspGAC 18 LeuTTA 18 LeuCTT 17 TyrTAC 27 CysTGC 32 TyrTAT 27 CysTGT 19 LysAAG 28 LysAAA 15 ValGTG 17 GlnCAA 18 ValGTT 16 GlnCAG 18 PheTTT 30 ValGTC 15 PheTTC 20 ValGTA 14 GluGAA 16 GluGAG 9