[发明专利]一种诊断猪瘟抗体的间接酶联免疫吸附测定方法无效
| 申请号： | 200310103413.4 | 申请日： | 2003-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN1540350A | 公开（公告）日： | 2004-10-27 |
| 发明（设计）人： | 刘湘涛;谢庆阁;魏旭文;马军武 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/558;G01N33/573 |
| 代理公司： | 北京亚沛专利事务所 | 代理人： | 王亚轩 |
| 地址： | 730046*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明的目的在于提供一种以重组蛋白为抗原建立间接酶联免疫吸附(ELISA)检测抗体的方法。该方法步骤包括，将猪瘟病毒结构蛋白E2基因中编码抗原的基因片段连接到质粒pGEM－T Easy载体上，获得重组质粒；将重组质粒纯化，与表达载体pPROEX－HTb相连，并转入大肠杆菌；培养转化的大肠杆菌，使带有所述基因片段的表达载体在大肠杆菌中表达；将表达的蛋白经包涵体提取、变性后，纯化、复性；以复性后的融合蛋白为抗原，间接酶联免疫吸附检测猪血清样本中抗体；根据测定值对样本的抗性进行判断。该方法具有成本低廉，操作简单，易于培养，生产周期短等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 诊断 猪瘟 抗体 间接 免疫 吸附 测定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测猪瘟抗体的方法，包括以下步骤：将猪瘟病毒结构蛋白E2基因中编码抗原的基因片段连接到质粒pGEM-T Easy载体上，获得重组质粒；将重组质粒纯化，与表达载体pPROEX-HTb相连，并转入大肠杆菌；培养转化的大肠杆菌，使带有所述基因片段的表达载体在大肠杆菌中表达；将表达的蛋白经包涵体提取、变性后，纯化、复性；以复性后的融合蛋白为抗原，间接酶联免疫吸附检测猪血清样本中抗体；根据测定值对样本的抗性进行判断。根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗原区基因片段为N端区中编码外膜糖蛋白gp55的基因。
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