[发明专利]由节杆菌制备生物絮凝剂的方法

摘要

本发明提供一种由节杆菌制备生物絮凝剂的方法，包括菌种发酵培养和生物絮凝剂的制备，选用节杆菌为生物絮凝剂菌种，经发酵培养和提取制得水处理生物絮凝剂。该方法与现有技术相比具有生产周期短、絮凝效率高、使用无二次污染、能够适应大规模生产及工业应用等特点，具有很好的推广应用价值。

主权项

1、一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于选用节杆菌为生物絮凝剂菌种，经发酵培养和提取制得水处理生物絮凝剂，该生物絮凝剂的制备采用以下步骤：a)菌种的制备由土壤采样、分离获得节杆菌(Arthrobacter Sp.)LF-Tou2。选择性的培养基重量组成(g/L)：环己烷 5-15 (NH4)2SO4 2-7 K2HPO4 1-5 KH2PO4 1-4MgSO4 0.1-0.4 NaCl 0.05-0.3 琼脂粉 10-20 pH 7.0-7.4复筛培养基的重量组成(g/L)：葡萄糖 7-12 (NH4)2SO4 2-5 K2HPO4 1-5KH2PO4 1-4 MgSO4 0.1-0.5 NaCl 0.1-0.3用作固体培养时加琼脂粉 10-20 pH 7.0-7.4接种后培养条件为170转/分，30℃摇床培养1-2天，测定发酵液的絮凝活性。初选方法：用选择性筛选培养基制作平板，用土壤浸液涂布接种。30℃温箱培养1-7天，挑取生长快、透明圈大的菌落转于固体斜面、30℃温箱培养1-3天，4℃保存。b)菌种发酵培养将初选出节杆菌菌种按培养液总重量的1-2％的比例接种于配有液体发酵培养基的发酵罐中搅拌发酵，发酵温度为24-32℃，鼓入空气量为0.25-1.5L/L分钟，pH＝7.0-7.4，搅拌培养1-2天备用；c)生物絮凝剂的制备：液体发酵培养基是由以下重量配比原料组成：葡萄糖8-15份，(NH4)2SO4 1-5份，K2HPO4 0.1-1份，KH2PO4 0.05-1份，MgSO4 0.1-1份，NaCl 0.2-1.5份，CaCl 0.2-1.5份，水1000份。(1)发酵液通过离心机离心分离10-40分钟，除去沉淀，取上清液备用；(2)向上清液中加入0.05-0.15％钙离子和2.5倍体积的无水乙醇，室温静置30-60分钟，再用离心机离心分离10-20分钟，得絮凝剂粗品沉淀物备用；(3)沉淀物用0.5-3.0％，pH＝5-6的氯化钠溶液溶解，用0.3-1倍沉淀物体积的十六烷基三甲基溴化铵吸附，再经离心分离得沉淀物备用；(4)将沉淀用5-15％的氯化钠溶解搅拌6-18小时，加入2.5-3.5倍体积的乙醇，搅拌均匀，静置20-30分钟，离心得沉淀物，把沉淀物用无水乙醇醇洗和真空干燥得生物絮凝剂产品。