[发明专利]一种DNA光修复酶的活性检测方法无效
申请号: | 200310106548.6 | 申请日: | 2003-12-05 |
公开(公告)号: | CN1624151A | 公开(公告)日: | 2005-06-08 |
发明(设计)人: | 王玉珍;沐万孟;俞书勤;宋钦华;章东方;罗昭锋 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | C12Q1/25 | 分类号: | C12Q1/25;C12Q1/68;G01N30/02 |
代理公司: | 合肥华信专利商标事务所 | 代理人: | 余成俊 |
地址: | 230026*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明DNA光修复酶的活性检测方法,特征是:将DNA光修复酶与含胸腺嘧啶二聚体的DNA底物经近紫外照射不同时间的相应产物经分子-排阻高效液相色谱分析,在线检测底物单峰的260nm紫外吸收,根据底物所出的峰,计算峰面积及其变化值,即胸腺嘧啶二聚体的解聚程度,根据胸腺嘧啶二聚体解聚程度和时间比确定DNA光修复酶的活性;该方法操作简单,可方便地利用操作和分析软件对变化前后的DNA底物进行定量,结果可信度高,克服了现有技术对酶底物要求高、步骤繁杂、实验操作难、环境污染的缺陷,适合于DNA光修复酶的实验室纯化和其产业化制备过程中的活性检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 dna 修复 活性 检测 方法 | ||
【主权项】:
1、一种DNA光修复酶的活性检测方法,包括:先制备含胸腺嘧啶二聚体的DNA底物,然后将含胸腺嘧啶二聚体的DNA底物与DNA光修复酶混合于反应缓冲液中用近紫外光照射,得到各不同照射时间的相应产物;其特征在于:将DNA光修复酶与含胸腺嘧啶二聚体的DNA底物经近紫外照射不同时间的相应产物经分子-排阻高效液相色谱分析,在线检测底物单峰的260nm紫外吸收,根据底物所出的峰,计算峰面积的变化值,即胸腺嘧啶二聚体的解聚程度,根据胸腺嘧啶二聚体解聚程度和时间的比确定DNA光修复酶的活性。
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