[发明专利]含有阿特拉津氯水解酶基因的Ti载体的构建及转基因水稻的制备无效
申请号: | 200310107313.9 | 申请日: | 2003-12-12 |
公开(公告)号: | CN1546673A | 公开(公告)日: | 2004-11-17 |
发明(设计)人: | 蔡宝立;王松文;孙宗修;施利利;刘霞;韩宇宁 | 申请(专利权)人: | 南开大学;天津农学院;中国水稻研究所;天津市农业生物技术研究中心 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12N5/10;A01H5/00;A01H1/00;C12Q1/68 |
代理公司: | 天津市学苑有限责任专利代理事务所 | 代理人: | 解松凡 |
地址: | 300071天津市卫津路94号*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种含有阿特拉津氯水解酶基因的Ti载体的构建、抗除草剂阿特拉津的转基因水稻的制备及在杂交制种中的应用,载体的构建是通过将阿特拉津氯水解酶基因插入质粒pCAMBIA1301实现的,得到可用于转化水稻的Ti载体p1301-atzA,将该Ti载体转化到农杆菌EHA105中,然后用农杆菌转化水稻,得到抗除草剂阿特拉津的水稻品系,用本发明制备的转基因水稻技术可用于杂交水稻的高纯度制种、机械化制种和杂草的防除,由于阿特拉津是国内外大量生产和使用的除草剂,而且价格便宜,所以使抗阿特拉津的转基因水稻更容易在农业生产中推广应用。 | ||
搜索关键词: | 含有 阿特拉津氯 水解 基因 ti 载体 构建 转基因 水稻 制备 | ||
【主权项】:
1.一种含有阿特拉津氯水解酶基因的Ti载体的构建,其特征包括如下步骤:①用EcoR I和HindIII消化含有阿特拉津氯水解酶基因的质粒pGEM-T-atzA,分离出阿特拉津氯水解酶基因;②用EcoRI和HindIII消化质粒pBluscript SK(/-),分离载体片段,与所述阿特拉津氯水解酶基因连接,形成中间载体pBSSK(/-)-atzA;③用Sal I和Sac I消化中间载体pBSSK(+/-)-atzA,分离含阿特拉津氯水解酶基因的小片段,用Sal I和Sac I消化质粒pCAMBIA1301,分离中间载体片段,与阿特拉津氯水解酶基因小片段连接,形成Ti载体p1301-atzA,构建结果见图1;④将该Ti载体p1301-atzA先转化到大肠杆菌DH5α中,提取质粒,再转化到农杆菌EHA105中。
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