[发明专利]一种葛仙米藻种的制备方法

摘要

本发明公开了一种葛仙米藻种的制备方法，该方法通过选取藻种、清洗杀菌、匀浆、接种培养，得到大量的葛仙米藻种。本发明与现有技术相比具有以下优点：操作简单、不需要抗生素进行无菌纯化、藻种制备周期短、效率高、因此形成的藻种数量多，适合大规模藻种制备的需要。

主权项

1、一种葛仙米藻种的制备方法，其特征在于，该方法按下列步骤顺序进行：(1)、将葛仙米球形群体用水洗净，置于70％-95％乙醇溶液浸泡10-40秒，去杂藻，然后在无菌水或培养液中清洗1-3次；(2)、将葛仙米球形群体放入匀浆器中，加入葛仙米球形群体重量0.1-1.0倍的培养液，匀浆，成丝状藻浆；(3)、培养液的配方为： 磷酸氢二钾20-60mg/L、 硫酸镁40-80mg/L、 氯化钙20-40mg/L、 柠檬酸4-8mg/L、 柠檬酸铁铵5-9mg/L、 乙二胺四乙酸二钠盐1-2mg/L、 碳酸钠5-30mg/L、 微量元素0.5-3ml/L、 余者为水；其中微量元素为每1000毫升含： 硼酸1.5-3g、 氯化锰1-2g、 硫酸锌0.1-0.25g、 镍酸钠0.2-0.4g、 硫酸铜0.02-0.1g、 硝酸钴0.03-0.05g、 余者为水；在培养液中加入其重量0.8-1.5％的琼脂，在灭菌锅灭菌10-20分钟，成固体培养基；(4)、将丝状藻浆接种于固体培养基中，培养条件为18-33℃，光照强度为10-200μE·m-2·s-1，培养8-20天；(5)、然后再接种在培养液中，培养条件条件为18-33℃，光照强度为10-200μE·m-2·s-1，经10-15天培养，藻丝便可形成微球体即成藻种；(6)、制备大规格藻种时，将原培养液去掉，更换成新鲜的培养液，在光照强度为10-400μE·m-2·s-1中，通气培养。