[发明专利]海洋源枯草芽孢杆菌杀虫活性产物的培育方法及其应用

摘要

本发明涉及一株海洋源枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)杀虫活性产物的培育方法及其应用。它以棉铃虫为指示试虫，采用浸虫法和筛选法对采自中国海域的海洋微生物进行了生物活性筛选，获得了一株高活性菌株；并接种于发酵培养基中培养，获得活性产物；该活性产物可溶解于水或缓冲液中，分子量大于8KD。该活性产物对多种农业害虫具有灭杀活性。本发明的优点在于：海洋源枯草芽孢杆菌杀虫活性产物的培育过程中所涉的原料容易获得，发酵条件简单，对设备要求低；获得的杀虫活性产物具有高效、广谱；活性产物源于微生物的次生代谢产物，对环境及非靶标生物安全，不会造成环境污染。

主权项

1、海洋源枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)杀虫活性产物的培育方法，其特征在于：a)以农业中重要的害虫棉铃虫为指示试虫，采用常规浸虫法和微型筛选法两种不同的筛选方法，对采自中国海域的海洋微生物进行了生物活性筛选，获得了一株高活性菌株；b)该细菌接种于发酵培养基中，于28℃，200r/min摇床震荡培养72-96h，可获得高产量杀虫活性产物；c)所述的发酵培养基中，碳源可以为可溶性淀粉或大豆粉，氮源可以为大豆粉或蛋白胨，发酵中使用的无机组分可以为碳酸钙；d)发酵在需氧条件下进行，发酵温度28～30℃，并调整到PH＝7.0～8.0。e)该菌株产生的杀虫活性产物，在培养过程中分泌于细胞外，储存于培养基中，该活性产物可溶解于水或缓冲液中，用常用的有机溶剂不能从发酵液中提取出来，该活性产物的分子量大于8KD。