[发明专利]ALBSIN/IL－18MAT杂交细胞因子

摘要

ALB_SIN是人血清白蛋白的信号肽，IL－18_MAT为人IL－18的成熟肽。本发明采用基因重建方法，获得ALB_SIN与IL－18_MAT的嵌合分子。从人基因组DNA扩增ALB_SIN序列；由人IL－18原核表达质粒获得IL－18_MAT序列。以非对称PCR技术得到ALB_SIN编码区的反义链和IL－18_MAT正链。采用重叠延伸PGR(SOE－PCR)产生具有ALB_SIN与IL－18_MAT的杂交编码序列。定向插入pcDNA3，构建杂交IL－18的真核表达质粒。测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成，且无移码。该表达质粒转染293、Vero和7721细胞，表达具有生物活性的人IL－18。

主权项

1、一种ALBSIN/IL-18MAT杂交细胞因子，其重组的核苷酸/氨基酸片段序列是：cccgcaagctt atg aag tgg gta acc ttt att tcc ctt ctt ttt ctc ttt M K W V T F I S L L F L Fagc tcg gct tat tcc tac ttt ggc aag ctt gaa tct aaa tta tca gtcS S A Y S Y F G K L E S K L S Vata aga aat ttg aat gac caa gtt ctc ttc att gac caa gga aat cggI R N L N D Q V L F I D Q G N Rcct cta ttt gaa gat atg act gat tct gac tgt aga gat aat gcaP L F E D M T D S D C R D N Accc cgg acc ata ttt att ata agt atg tat aaa gat agc cag cct agaP R T I F I I S M Y K D S Q P Rggt atg gct gta act atc tct gtg aag tgt gag aaa att tca act ctcG M A V T I S V K C E K I S T Ltcc tgt gag aac aaa att att tcc ttt aag gaa atg aat cct cct gatS C E N K I I S F K E M N P P Daac atc aag gat aca aaa agt gac atc ata ttc ttt cag aga agt gtcN I K D T K S D I I F F Q R S Vcca gga cat gat aat aag atg caa ttt gaa tct tca tca tac gaa ggaP G H D N K M Q F E S S S Y E Gtac ttt cta gct tgt gaa aaa gag aga gac ctt ttt aaa ctc att ttgY F L A C E K E R D L F K L I Laaa aaa gag gat gaa ttg ggg gat aga tct ata atg ttc act gtt caaK K E D E L G D R S I M F T V Qaac gaa gac tga gggccctatN E D stop