[发明专利]有益微生物稳定化预处理工艺

摘要

本发明公开了一种有益微生物稳定化预处理工艺，将菌种在按重量百分比含有0.3－0.5％葡萄糖、0.3－0.5％氯化钠和0.3－0.5％蛋白胨的菌种液体或固体培养基中，以及在按重量百分比含有0.3－0.5％葡萄糖、0.5－1％氯化钠、0.8－1％蛋白胨和1.5－2.0％大豆低聚糖的益生元复壮液体或固体培养基中进行培养处理。本发明能够提高菌种的稳定性、增加菌种的传代次数、保持菌株的高活性。经本发明处理的菌种可以保存2年，菌种在传代100次后依然保持高活性。

主权项

1、一种有益微生物稳定化预处理工艺，其步骤为：a.在菌种液体培养基中加入2％琼酯，倒入无菌试管中，制成种子固体斜面培养基；在菌种液体培养基中加入2％琼酯，倒入无菌平板中，制成种子固体平板培养基；在益生元复壮液体培养基中加入2％琼脂，倒入无菌试管中，制成益生元复壮固体斜面培养基；b.从原始出发菌种中挑取一环菌体，接种到种子固体平板培养基上，划线分离，于36-37℃温度下培养12-16小时；c.待种子固体平板培养基上长出单细胞菌落，挑出单细胞菌落，接种在种子固体斜面培养基上，于36-37℃温度下培养12-16小时；d.将种子斜面固体培养基上长出的菌体，以1％的接种量接种到菌种液体培养基中，于36-37℃温度下，150-170rpm，摇床培养16-20小时，直到OD600＝0.7-0.9，停止培养；e.将步骤d中的菌液转至种子固体斜面培养基上，于36-37℃温度下培养6小时；f.从步骤e的固体斜面培养基上长出的菌体中再挑取一环菌体转至益生元复壮液体培养基上，于37℃温度下，150-170rpm，摇床培养16-20小时后，直到OD600 ＝0.7-0.9，停止培养；g.步骤f的益生元复壮液体培养基中长出的菌体中无菌吸取0.1ml菌体接种到益生元复壮固体斜面培养基上，于37℃温度下培养20-24小时，作为发酵菌种；或在步骤f中培养的菌液中按体积百分比添加菌液的12-15％的甘油，放置于-20℃温度下保存。