[发明专利]人体心肌肌钙蛋白Ⅰ的快速测定的方法无效
申请号: | 200310119332.3 | 申请日: | 2000-03-21 |
公开(公告)号: | CN1525172A | 公开(公告)日: | 2004-09-01 |
发明(设计)人: | 张寄南;苏恩本 | 申请(专利权)人: | 上海润东生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/543;G01N21/31 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 | 代理人: | 徐冬涛 |
地址: | 200135上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了人体心肌肌钙蛋白I的纯化和其单克隆抗体的制备方法以及一步法测定其含量的方法。其特点是采用亲和层析法纯化人体心肌肌钙蛋白I,利用该纯化的心肌肌钙蛋白I与BALB/c小鼠免疫制备该心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体,并建立了一步法测定心肌肌钙蛋白I含量的方法。其优点是所得抗体的同源性好,特异性和敏感性高。其检测方法操作简单,成本低。可广泛用于心脏病的检查。 | ||
搜索关键词: | 人体 心肌 肌钙蛋白 快速 测定 方法 | ||
【主权项】:
1、人体心肌肌钙蛋白I的快速测定的方法,其特征在于包含如下步骤:(1)用50~150mmoL/L,pH值为9.4~9.6的碳酸氢盐缓冲液、链亲和素包被96孔聚苯乙烯酶联板;(2)取待测样品和标准品,分别与联有生物素的抗心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体和联有辣根过氧化物酶的抗心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体相接触后,分别加入上述酶联板包被孔中;(3)将步骤(2)之酶联板进行孵育;(4)取孵育后的酶联板,在其包被孔中分别加入底物过氧化氢与2,2’-连氧-双-3-乙基苯噻唑林-6-磺酸盐进行酶促显色;(5)读取上述步骤(4)酶促显色后波长405nm时的吸光度,将待测样品与标准品进行对照,计算出待测样品中的心肌肌钙蛋白I的含量。
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