[发明专利]海洋小单孢菌抗菌类群的分离检出方法

摘要

涉及一种能够选择性地把海洋小单孢菌抗菌类群分离检出的方法。其步骤为制备样品，取上部菌悬液用于分离；配置培养基；配置重铬酸钾(K₇Cr₂O₇)溶液、放线菌酮溶液，分别过滤除菌；倒平板；小单孢菌分离；斜面转接：取分离平板上小菌落转接于伊英逊斜面，继续培养获得成熟的菌株；挑取带紫红色的菌株。提供一种能够选择性地分离海洋小单孢菌，并根据菌株的颜色特征快速获得抗菌类群的方法。通过测定，发现小单孢菌抗菌活性菌株主要集中在产紫色可溶色素的类群中，该类群70％～80％的菌株具有抗菌活性，可获得高比例的抗菌活性菌株，大大地提高了筛选效率。

主权项

1、海洋小单孢菌抗菌类群的分离检出方法，其特征在于其步骤为1)样品制备：样品风干15天以上，粉碎，过40～80目筛，110～120℃干热处理1～2h，称取样品溶解于相当于样品5～15倍的无菌水中，加入终浓度为0.8％～1.2％的苯酚，35～45℃水浴20～30min，室温静置，上部菌悬液用于分离；2)配置改良高氏一号培养基：可溶性淀粉1％～3％，KNO3 0.5％～1.5％，K2HPO4 0.04％～0.06％，MgSO4 0.04％～0.06％，琼脂1.5％～2％，余为陈海水；常规高压灭菌20～30min；3)配置重铬酸钾(K7Cr2O7)溶液；放线菌酮溶液。分别用微孔滤膜过滤除菌；4)倒平板：取刚灭完菌的培养基，使培养基中的K7Cr2O7溶液和放线菌酮的终浓度分别为50～100ppm，倒平板；5)小单孢菌分离：取制备好的上述菌悬液于凝固的平板上，用无菌涂抹棒涂抹分散细胞，常温倒置培养14～21天；6)斜面转接：取分离平板上粉红色的小菌落，转接于伊英逊斜面，1周后涂散菌落，继续培养7～14天即可获得成熟的菌株；7)培养成熟后，挑取带紫红色的菌株。