[发明专利]用质谱法高灵敏度定量肽

摘要

本发明提供了一种用于测定样品中靶蛋白数量的经济的流通型方法。用一种抗体制剂(不论是多克隆、单克隆或任何等价的特定结合剂)来捕获并从而富集特定的监测肽(在复杂蛋白样品的蛋白水解液中要定量的蛋白质的特定肽片段)及内标肽(具有同样的化学结构但包括稳定的同位素标记)。当洗脱到适宜的质谱仪中时，对天然的(源于样品的)和内标(同位素标记)肽进行定量，其所测定的丰度比较用计算起始样品中监控肽及其母体蛋白的数量。

主权项

1.一种用于定量样品中至少一种靶蛋白数量的方法，包括以下步骤：1)将样品消化以提供肽，2)制备至少一种经标记的含所述靶蛋白亚序列的监测肽从而提供内标物，3)将含已知量的标记的合成肽的步骤2)产物的一等份加到步骤1)产物中去，4)将步骤3)产物装载在至少一种支持物上，该支持物上连接有至少一种结合至少一种监测肽的结合剂，5)洗涤步骤4)的支持物以除去未结合的肽，6)从结合到支持物上的结合剂上洗脱监测肽，7)将存在于步骤6)所得洗脱液中的至少一种监测肽进行质谱检测从而通过与标记的合成标准物比较而确定消化液中监测肽的数量。