[发明专利]植物细胞培养生产有用代谢产物的固液两步培养法

摘要

植物细胞培养生产有用代谢产物的固液两步培养法，属于植物细胞培养生产次生代谢产物的技术领域。为了解决植物细胞生长与其代谢产物合成具有相互抑制作用的矛盾，本发明将细胞生长和产物合成分为两步培养，包括以下步骤：1)配制基本培养基；2)配制固体培养基，将筛选出的快速生长的细胞株系接种在所述固体培养基上，在20～25℃避光或照光条件下培养，获得植物愈伤组织；3)取所述基本培养基，向其中添加促进目标产物合成的前体物质或诱导子，调整pH值，配成液体培养基；4)将植物愈伤组织接种在液体培养基上，在20～25℃避光或照光条件下，催化合成目标代谢产物；5)收取细胞团和培养液，并通过分离纯化获得目标代谢产物。

主权项

1.植物细胞培养生产有用代谢产物的固液两步培养法，其特征在于该方法包括如下步骤：1)在植物组织与细胞培养基中，按每升培养液加入0.1～4mg生长素、0.1～4mg细胞分裂素，以及20～60g蔗糖或葡萄糖，调pH值在5.5～7，作为基本培养基；2)取所述基本培养基，向其中按每升培养液加入7～10g琼脂或2g高效凝固剂制成固体培养基；将筛选出的快速生长的细胞株系接种在所述固体培养基上，在20～25℃避光或照光条件下培养，获得植物愈伤组织；3)取所述基本培养基，向其中添加促进目标产物合成的前体物质或诱导子，将培养液pH值调整到5.5～7，经灭菌消毒后配成液体培养基；4)将步骤2)中获得的植物愈伤组织经过不锈钢网筛分后，接种在所述液体培养基上，在20～25℃避光或照光条件下，催化合成目标代谢产物；5)收取细胞团和培养液，并通过分离纯化获得目标代谢产物。