[发明专利]禽流感病毒反转录聚合酶链式反应检测方法及试剂盒无效
申请号: | 200410010805.0 | 申请日: | 2004-04-19 |
公开(公告)号: | CN1690220A | 公开(公告)日: | 2005-11-02 |
发明(设计)人: | 金宁一;马鸣潇;郑敏;李昌;王振国;金扩世;秦晓冰;鲁会军;夏志平;金洪涛 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军需大学军事兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/25 | 分类号: | C12Q1/25;C12Q1/04;C12Q1/68 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 | 代理人: | 白冬冬 |
地址: | 130062吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 一种禽流感病毒反转录聚合酶链式反应检测方法及试剂盒,属于生物技术领域,特别是涉及一种禽流感病毒检测的方法。本发明目的在于建立了禽流感病毒通用型RT-PCR检测方法和H5、H7、H9亚型分型检测的三联RT-PCR检测方法,最终组装成禽流感病毒(Avian Influenza Virus AIV)系列RT-PCR检测试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 禽流感 病毒 转录 聚合 链式反应 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
1、一种禽流感病毒反转录聚合酶链式反应检测方法,其步骤是:a、建立AIV基因储备库:用收集到的H5、H9亚型AIV毒株,进行克隆,建立AIV基因储备库;b、根据AIV M1P基因具有型的特异性,确定通用型RT-PCR检测方法的靶序列为M1P基因;根据AIV HA基因具有亚型的特异性,确定亚型分型检测的RT-PCR检测方法的靶序列为HA基因;c、引物设计:借助DNASTAR软件设计特异性RT-PCR引物;d、通用型RT-PCR检测方法建立:用通用型引物对所收集到的H5、H9亚型AIV毒株进行RT-PCR,建立通用型RT-PCR检测方法;e、亚型单项RT-PCR检测方法建立:用H5、H7、H9亚型分型检测引物分别对相应毒株、质粒进行RT-PCR或PCR和反应条件的优化,建立各亚型的单项RT-PCR检测方法。
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