[发明专利]灵芝菌丝体三萜类物质提取工艺

摘要

一种工业化的灵芝菌丝体三萜类物质提取工艺，通过对灵芝菌种的改良、发酵工艺的步骤、参数和培养基配方的改进以及三萜类物质提取工艺的改进，成功地建立了工业化规模的灵芝菌丝体三萜类物质提取工艺。通过该工艺改良的菌种三萜含量较高、发酵生产的规模高于现有的生产技术，而且采用的发酵工艺有利于灵芝三萜类物质的合成和积累，在提取工艺方面利用食用级的提取溶剂，使生产过程和产成品的安全性有了很大的提高。本发明工艺的灵芝菌丝干粉得率达0.8％～1.2％，每百克菌丝干粉的三萜类物质含量达到5～7克，提取后的三萜类物质含量＞25％。

主权项

1、一种灵芝菌丝体三萜类物质提取工艺，其特征是包括以下步骤：(1)将制备的灵芝原生质体与亚硝基胍混合后震荡40～60分钟后离心，接入发酵培养基培养8天，进行摇瓶培养筛选，筛选发酵产率和三萜类物质含量高的菌种作为生产菌种；(2)将摇瓶培养的灵芝生产菌种接入500L的一级种子罐，保持罐温20～22℃，罐压20～30kPa，搅拌速率60～80r/min，通气量1∶0.2～0.3，培养90～100小时；(3)将种子罐菌种转接到5吨罐中，保持罐温20～22℃，罐压20～30kPa，搅拌速率60～80r/min，通气量1∶0.3～0.4，培养90～100小时；(4)将二级种子罐中菌种转接到50吨发酵罐中，保持罐温20～22℃，罐压30～40kPa，搅拌速率60～80r/min，通气量为1∶0.4～0.5，培养72～80小时，然后将发酵罐温度降低到17～19℃，继续培养24小时，然后将发酵液用板框压滤机压滤，得湿菌丝体；(5)将1吨灵芝湿菌丝体加入5～6吨95％食用酒精回流提取两次，每次2～3个小时，合并两次的溶剂，总体积为10～12吨，然后在酒精浓缩罐中50～55℃减压浓缩至体积为1～1.2吨，浓缩液加入2～3吨饱和的碳酸氢钠溶液进行萃取，萃取液在0～5℃条件下加入磷酸，将pH值调至4，过滤分离沉淀，沉淀中加入400～600公斤食用酒精回流提取1～2小时，提取液进行真空干燥，得到灵芝菌丝体三萜提取物。