[发明专利]一种诱发水稻抗氯磺隆体细胞突变体的方法无效

专利信息
申请号: 200410013211.5 申请日: 2004-05-26
公开(公告)号: CN1582639A 公开(公告)日: 2005-02-23
发明(设计)人: 冯双华;肖国樱 申请(专利权)人: 中国科学院亚热带农业生态研究所
主分类号: A01H3/04 分类号: A01H3/04;A01H4/00;C12N5/04
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 代理人: 王敏锋
地址: 41012*** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 发明公开了一种诱发水稻抗除草剂体细胞突变体的方法。它由诱导培养、继代培养、筛选培养、分化培养、再分化培养组成。操作者先将健康成熟种子去壳,再在无菌条件下,将成熟胚置于乙醇中浸泡,用氯化汞溶液浸泡,用无菌水冲洗,将已消毒的成熟胚接种在诱导培养基上加入5-溴尿嘧啶诱变剂黑暗培养;诱导培养的愈伤组织转入继代培养基上黑暗培养;愈伤组织再转入筛选培养基上加入氯磺隆黑暗培养;筛选培养后,将已成活的愈伤组织转入分化培养基上光照培养,再将已分化的愈伤绿块转入再分化培养基上并加入氯磺隆除草剂,在光照下筛选培养。本发明操作简便,效果好,适应性广,培育一个抗除草剂新品种比常规育种方法提前3-4年完成。
搜索关键词: 一种 诱发 水稻 抗氯磺隆 体细胞 突变体 方法
【主权项】:
1、一种诱发水稻抗氯磺隆体细胞突变体的方法,它包括下列步骤:A、配制培养基,诱导培养基:基本培养基中加入2mg/L二氯苯氧乙酸和20-30mg/L5-溴尿嘧啶;继代培养基:培养基中加入2mg/L2,4-D和0.2mg/L6-苄基氨基嘌呤;筛选培养基:培养基中加入2mg/L2,4-D和0.2mg/L6-BA及25-50mg/L氯磺隆;分化培养基:培养基中加入2mg/6-BA和0.5mg/L萘乙酸;再分化培养基:培养基中加入2mg/L6-BA和0.5mg/LNAA及50-60mg/L氯磺隆;B、培养时间:诱导、继代、筛选培养,将已消毒的成熟胚材料接于诱导培养基上,置于黑暗条件下进行诱导愈伤组织培养,并加入5-溴尿嘧啶诱变剂培养18-20天;继代培养:将诱导培养基上的愈伤组织转入继代培养基上培养18-20天,扩大愈伤组织抗氯磺隆细胞群体;筛选培养:将继代培养获得的愈伤组织切割成直径为1.5-2.0毫米,转入筛选培养基上培养18-20天;C、分化、再分化培养时间:在光照条件下愈伤组织进行再分化绿苗培养,12-14小时的光周期,分化培养,将筛选培养基上已成活的愈伤组织转入分化培养基上培养15-16天分化绿块;15-16天后进入再分化培养,将已分化的愈伤绿块转入再分化培养基上培养15-16天,筛选抗氯磺隆除草剂再生植株苗;D、诱导、继代、筛选、分化培养温度控制在26-27℃。
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