[发明专利]自体胸水上清培养TIL细胞的方法无效
| 申请号： | 200410014095.9 | 申请日： | 2004-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN1560234A | 公开（公告）日： | 2005-01-05 |
| 发明（设计）人： | 刘宝瑞;邹征云 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 | 代理人： | 孙鸥 |
| 地址： | 210008*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用自体胸水上清进行TIL细胞的培养方法。本发明采用将收集的癌性胸水离心后保存上清，用作培养基，将下层细胞中的白膜层细胞至该上清培养基中培养，得悬浮的TIL细胞，再至孵箱内培养，1天后加入OKT3、IL－2、PHA等，1、2天再加入IL－2进行培养。本发明的实验数据表明该方法是可行的，与现有方法相比，某些方面相同，某些方面更优。而本发明却避免了现有方法使用人AB血清可能导致的乙肝、爱滋病等传染，体外培养时间过长所增加的污染机率，以及培养时间过长增加病人负担，延长治疗时间和成本增加等缺陷。 | ||
| 搜索关键词： | 水上 培养 til 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.自体胸水上清培养TIL细胞的方法，无菌收集癌性胸水，离心后保存上清，用淋巴细胞分离液分离下层细胞，去除下层细胞中的红细胞、坏死组织碎片，其特征在于(1)将上清留作培养基；(2)取下层细胞中的白膜层细胞至上清培养基培养；(3)12～24小时后，肿瘤细胞全部贴壁，悬浮的是TIL细胞；(4)将浓度在5×105/ml～1×106/ml的TIL细胞置于饱和湿度、5％二氧化碳孵箱内培养，温度控制在37℃内；(5)1天后，加入终浓度50～100ng/ml的OKT3、800～6000U/ml的IL-2、50～100ug/ml的PHA；(6)隔1～2天，加入含800～6000U/ml的IL-2的完全培养基进行培养。
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