[发明专利]一种利用甲醇酵母系统高效表达tPA等外源蛋白的方法及其表达产物的纯化制备技术无效
| 申请号： | 200410017881.4 | 申请日： | 2004-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN1757745A | 公开（公告）日： | 2006-04-12 |
| 发明（设计）人： | 黄秀东;李树刚;于廷和 | 申请（专利权）人： | 黄秀东;唐德江 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C12N15/62 |
| 代理公司： | 重庆市恒信专利代理有限公司 | 代理人： | 刘小红 |
| 地址： | 201206上海市浦东新区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种甲醇酵母通用表达载体PICZa－DoI的构建，其关键是可以利用该表达系统以融合蛋白的方式生产一类常规方法难以高水平表达的外源重组蛋白。采用此表达系统已经成功的表达了突变型人组织纤溶酶原激活物(rPA)、人膜联蛋白V－尿激酶活性片段融合蛋白(Anx－scUK)和突变型人神经生长因子(mut－hNGF)等。该表达系统的产生的融合蛋白可以通过螯合层析(Chelating Sepharose FF)介质从发酵液中直接捕获，经过脱盐、酶切或化学切割开融合蛋白，再用常规的层析介质就可以纯化制备出纯度合乎要求的目的蛋白作为医药用途。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 甲醇 酵母 系统 高效 表达 tpa 等外 蛋白 方法 及其 产物 纯化 制备 技术 | ||
【主权项】：
1.一种通过基因工程菌株制备一大类目的蛋白或多肽的方法，通过此方法表达出的蛋白质具有CP-LS-CS-IP样的特征性结构，其中CP-代表伴侣蛋白(CP-，Chaperon Protein)LS-指连接肽的序列(LS-，Linker Squence)CS-是蛋白酶法或化学法切割时的识别肽段序列(CS-，Cleavage Squence)IP-表示目的蛋白或多肽(IP，Interest of Protein/Peptide)。
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