[发明专利]II型猪圆环病毒核酸疫苗的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种II型猪圆环病毒核酸疫苗的制备方法及其应用。制备方法为：1)设计特异性引物，以PCV2杭州株(HZ0201)的基因组为模板，通过PCR的方法克隆PCV－2的ORF1、ORF2、ORF3和ORF4基因，与pCI－neo构建为真核表达载体；2)分离猪外周血单个核细胞，通过RT－PCR方法克隆猪IFN、IL－2和IL－4基因，并与pCI－neo构建为真核表达载体；3)以上述重组载体为基础，分别构建PCV2ORF2与PCV2的其它基因或与猪细胞因子基因的融合表达载体；本发明的优点：(1)不需培养病毒，生产周期短；(2)不需细胞培养，有效防止其它猪源病毒的污染；(3)不表达对机体有害的致病蛋白，安全性高；(4)可同时激活体液免疫与细胞免疫应答。

主权项

1.一种猪II型圆环病毒核酸疫苗的制备方法，其特征在于方法的步骤为：1)设计特异性引物，以PCV2杭州株(HZ0201)的基因组为模板，通过PCR的方法克隆PCV-2的ORF1、ORF2、ORF3和ORF4基因，与pCI-neo构建为真核表达载体，以PCV2 ORF1、ORF2、ORF3、ORF4基因作为PCV2核酸疫苗的基本组成部分；2)分离猪外周血单个核细胞，通过RT-PCR方法克隆猪IFN、IL-2和IL-4基因，并与pCI-neo构建为真核表达载体，以猪IFN-γ、IL-2、IL-4基因作为基因佐剂；3)以上述重组载体为基础，分别构建PCV2 ORF2与PCV2的其它基因或与猪细胞因子基因的融合表达载体。