[发明专利]用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆及其制备方法和用途无效
| 申请号： | 200410025055.4 | 申请日： | 2004-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN1584028A | 公开（公告）日： | 2005-02-23 |
| 发明（设计）人： | 韩焕兴;倪健;杨子义;何玮 | 申请（专利权）人： | 上海富纯中南生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N7/01;C07K16/18;C07K16/30;G01N33/53 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 | 代理人： | 余明伟 |
| 地址： | 201203上海市浦东新区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆及其制备方法和用途。选择合适的自身免疫病患者，提取高表达自身抗体的B淋巴细胞和浆细胞，提取RNA，扩增与克隆抗体基因，应用Helper噬菌体构建表面展示文库，多轮重复筛选该文库，酶切去除gpIII基因片段，重新连接后转化感受态菌进行可溶性表达，选取单克隆抗体进行增菌表达，挑选出阳性克隆；该克隆能够用于筛选肿瘤坏死靶向抗体。本发明所选的供体合适，其自身抗体效价高，获得阳性克隆的几率高，且能同时获取多个克隆；还能进一步得到一种新的人源性抗体，该抗体无需人源化处理，使该抗体的生产成本大幅度降低，是一种操作简单易用、能快速产业化的实用方法。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 筛选 肿瘤 坏死 靶向 抗体 克隆 及其 制备 方法 用途 | ||
【主权项】：
1.一种用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆，其特征在于，该克隆是用以下方法制备得到的，该方法包括以下两个主要步骤：①构建人源自身抗体噬菌体表面呈现文库；A.选择供体与提取RNA；B.扩增与克隆抗体基因；C.应用Helper噬菌体，构建完成表面展示文库；②从该文库中筛选阳性克隆；A.应用固相包被抗原，对文库进行多轮重复筛选；B.纯化噬粒载体酶切去除gpIII基因片段，重新连接后转化感受态菌进行可溶性表达；C.选取单克隆抗体进行增菌表达，再从中挑选阳性克隆。
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