[发明专利]重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法有效
| 申请号： | 200410027943.X | 申请日： | 2004-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN1718739A | 公开（公告）日： | 2006-01-11 |
| 发明（设计）人： | 李政海;胡家华;李继东 | 申请（专利权）人： | 深圳新鹏生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12N1/20;C07K14/525;C07K1/34 |
| 代理公司： | 深圳睿智专利事务所 | 代理人： | 陈鸿荫;周惠来 |
| 地址： | 518057广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括步骤：a.选用工程菌DH5α－PBV220－hGCSF菌株进行发酵培养；b.对发酵培养所得菌体进行包涵体的分离和洗涤，得到精制包涵体；c.对精制包涵体进行变性处理，得到变性所得物；d.对变性所得物进行第一次复性处理，得到第一次复性所得物；e.对第一次复性所得物进行超滤处理，得到超滤所得物；f.对超滤所得物进行进行第二次复性处理，得到第二次复性所得物；g.对第二次复性所得物进行层析处理，得到重组人粒细胞集落刺激因子，其纯度达到98％以上、比活性不低于4.0×108IU/mg。本制备方法为解决人粒细胞集落刺激因子制备上存在的表达率偏低、菌体产量偏低、包涵体复性率偏低、活性偏低以及成本偏高等问题提供了可能。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 粒细胞 集落刺激因子 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，其特征在于，包括步骤：a.选用工程菌DH5α-PBV220-hGCSF菌株进行发酵培养；b.对发酵培养所得菌体进行包涵体的分离和洗涤，得到精制包涵体；c.对精制包涵体进行变性处理，得到变性所得物；d.对变性所得物进行第一次复性处理，得到第一次复性所得物；e.对第一次复性所得物进行超滤处理，得到超滤所得物；f.对超滤所得物进行第二次复性处理，得到第二次复性所得物；g.对第二次复性所得物进行层析处理，得到重组人粒细胞集落刺激因子。
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