[发明专利]小麦高分子量谷蛋白亚基的酸性毛细管电泳鉴定方法

摘要

本发明涉及小麦高分子量谷蛋白亚基的鉴定方法，特别是涉及通过酸性毛细管电泳(A－CE)技术对小麦高分子量谷蛋白亚基进行鉴定的方法。小麦贮藏蛋白，特别是高分子量谷蛋白亚基的组成和含量对品质具有十分重要的作用。当前在小麦品质育种工作中的重点是对HMW－GS组成的改良，特别是要提高优质高分子量谷蛋白亚基或亚基对的频率。目前常规育种方法与标记辅助选择技术相结合是小麦品质改良的主要手段，其中杂交早期世代优质蛋白亚基快速、微量、准确的鉴定是提高育种效率的关键。本发明的主要任务是解决针对小麦种子中贮藏的高分子量谷蛋白亚基的鉴定给出酸性毛细管电泳的缓冲液类型和添加成分、电泳条件参数和毛细管冲洗程序。

主权项

1.一种小麦高分子量谷蛋白亚基的酸性毛细管电泳鉴定方法，包括材料取样、样品制备、高效毛细管电泳和数据处理分析，其中材料取样、样品制备以及数据处理采用的是常规方法，其特征是高效毛细管电泳时的电泳缓冲液为100-120mm磷酸-甘氨酸缓冲液，该缓冲液pH为2.5-2.8，添加有18-22％腈和0.04-0.06％羟脯氨酰甲基纤维素，具体电泳条件参数为： 毛细管的内径为25或50μm，长度为24-28cm 电压：10.0-13.5KV 温度：37-40℃ 进样：8-12KV，6-10sec。