[发明专利]转导肽－人胰岛素原融合蛋白的表达与应用

摘要

本发明涉及的是将含furin酶切位点的人胰岛素原cDNA克隆到转导肽基因的N或C末端，合成转导肽－人胰岛素原融合蛋白的多核苷酸；同时还涉及利用该多核苷酸构建融合表达的原核表达载体，表达转导肽－人胰岛素原融合蛋白。经过变性纯化后的融合蛋白，在转导肽的引导下，使胰岛素原蛋白高效进入细胞内，如皮肤细胞、肌细胞、肺泡细胞等。在这些非内分泌细胞内的furin酶的作用下，胰岛素原加工成具有天然生理活性的胰岛素，分泌到血液中，起到降低血糖的作用。本发明使糖尿病病人可以通过舌下含服、肺吸人、鼻粘膜及肛栓或皮肤吸收等多种方式用药，而无需注射即可达到有效的治疗疾病的目的。

主权项

1.一种转导肽-人胰岛素原融合蛋白的多核苷酸，其含有选自下列组的序列：(a)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；(b)编码SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核苷酸序列；(c)(a)或(b)的序列的变体序列，其中含有一个或多个插入、缺失、添加、或替代，并基本保持(a)或(b)序列的活性；(d)与(a)或(b)的序列有至少约75％同一性的序列；(e)与(a)或(b)的序列有至少约90％同一性的序列；(f)(a)或(b)的序列的简并变体；和(g)以上序列的互补序列。