[发明专利]同时检测细胞增殖抑制活性和毒性的方法

摘要

以增殖哺乳动物细胞样品为检测体系，同时检测物质的细胞增殖抑制活性和细胞毒性的方法，特征在于a)用物质以至少两个不同的预定浓度处理预定体积的作为细胞悬液或作为贴壁细胞的细胞样品；b)用第一荧光染料和任选用第二荧光染料处理细胞样品；c)向细胞样品中加入预定量的大小为约1－约20μm的胶乳颗粒至所述体积，并任选用第三荧光染料对胶乳颗粒进行染色；d)测定样品中细胞总数与胶乳颗粒数的比例；e)用步骤d)的结果及对样品进行流式细胞分析测定－死细胞或活细胞数；－每体积细胞总数；－每体积胶乳颗粒数；f)用步骤d)和e)的结果测定物质的细胞增殖活性和毒性。

主权项

1.一种以增殖的哺乳动物细胞样品为检测体系，同时检测一种物质的细胞增殖抑制活性和细胞毒性(诱导细胞死亡)的方法，其特征在于g)用所述物质以至少两个不同的预定浓度处理预定体积的作为细胞悬液或作为贴壁细胞的所述细胞样品；h)用对死细胞或活细胞特异染色的第一种荧光染料和任选地用染色所有细胞的第二种荧光染料处理所述细胞样品；i)向所述细胞样品中加入预定量的大小为约1-约20μm的胶乳颗粒至所述体积，并任选地用第三种荧光染料对所述胶乳颗粒进行染色；j)测定所述样品中细胞总数与胶乳颗粒数量的比例；k)用步骤d)的结果及通过对所述样品进行流式细胞分析测定-死细胞或活细胞的数目，其通过由所述第一种荧光染料在第一个波长下激发的荧光测定；-每体积的细胞总数目，其通过在第一个角度下散射光或备选地通过由所述第二种荧光染料在第二个波长下激发的荧光测定；-每体积的胶乳颗粒的数目，其通过在第二个角度下散射光或备选地通过由所述第三种荧光染料在第三个波长下激发的荧光测定；l)和用步骤d)和e)的结果测定所述物质的细胞增殖活性和毒性。