[发明专利]对肿瘤细胞有促凋亡功能的Survivin突变体重组腺病毒及获得方法无效
| 申请号： | 200410041045.X | 申请日： | 2004-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN1710080A | 公开（公告）日： | 2005-12-21 |
| 发明（设计）人： | 吴缅;那沙·阿丁·霍蒂;朱的娥;宋质银;王宜 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N7/01 |
| 代理公司： | 合肥华信专利商标事务所 | 代理人： | 余成俊 |
| 地址： | 230026安徽省合肥市*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子生物学领域，具体涉及生物基因工程技术。所述的Survivin突变体重组腺病毒，将Survivin基因序列的第158位碱基a突变为c，蛋白质序列第53位氨基酸D相应地突变为A。其获得方法包括引入突变、构建质粒和包装病毒。引入突变的步骤是首先根据已知野生型Survivin序列设计引物1和引物2，再根据突变原理设计含突变的引物3和引物4；用引物1和引物2从HeLa库中钓出Survivin基因，再分别扩增Survivin左右两部分片段，回收后等量加入，变性退火再循环，形成全长双链Survivin后进行第三轮PCR循环，扩增出含突变的Survivin(Surv－D53A)，此后再通过生物基因工程中常用方法构建质粒和包装病毒。从多项实验结果看出，本发明的重组腺病毒强烈诱导肝癌细胞、子宫颈癌细胞、肺癌细胞等癌细胞凋亡。 | ||
| 搜索关键词： | 肿瘤 细胞 有促凋亡 功能 survivin 突变体 重组 病毒 获得 方法 | ||
【主权项】：
1.一种对肿瘤细胞有促凋亡功能的Survivin突变体重组腺病毒，包括突变的Survivin基因，其特征在于，所述的Survivin基因序列的第158位碱基a突变为c，其基因序列表达式为atgggtgccccgacgttgccccctgcctggcagccctttctcaaggaccaccgcatctctacattcaagaactggcccttcttggagggctgcgcctgcaccccggagcggatggccgaggctggcttcatccactgccccactgagaacgagccagc158cttggcccagtgtttcttctgcttcaaggagctggaaggctgggagccagatgacgaccccatagaggaacataaaaagcattcgtccggttgcgctttcctttctgtcaagaagcagtttgaagaattaacccttggtgaatttttgaaactggacagagaaagagccaagaacaaaattgcaaaggaaaccaacaataagaagaaagaatttgaggaaactgcgaagaaagtgcgccgtgccatcgagcagctggctgccatggattga蛋白质序列第53位氨基酸D相应地突变为A，蛋白质序列表达式为：MGAPTLPPAWQPFLKDHRISTFKNWPFLEGCACTPERMAEAGFIHCPTENEPA53LAQCFFCFKELEGWEPDDDPIEEHKKHSSGCAFLSVKKQFEELTLGEFLKLDRERAKNKIAKETNNKKKEFEETAKKVRRAIEQLAAMD
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