[发明专利]一种人卵母细胞的贮存方法

摘要

一种人卵母细胞的贮存方法，其特征在于：先把人卵母细胞放在含有蔗糖(Sucrose)和1，2丙二醇(PROH)的冷冻保护液里进行预处理，再进行程序化的缓慢降温冷冻，然后贮存于液氮中；在需要使用时，使该人卵母细胞快速升温复苏，再将已解冻复苏的该人卵母细胞放入序贯培养液中，置入37±0.2℃、5％～6％CO₂浓度的孵箱内进行培养，以供体外受精。该方法能够提高人卵母细胞冻存后的存活率，操作简便，所需医用仪器和溶液简单、价廉，成本低、复苏率高，有利于解决人类不孕问题和计划生育国策的贯彻执行。

主权项

1、一种人卵母细胞的贮存方法，先把人卵母细胞放在含有蔗糖(Sucrose)和1，2丙二醇(PROH)的冷冻保护液里进行冷冻预处理，再进行程序化的缓慢降温冷冻，然后在液氮中进行低温贮存；在需要使用时，使该人卵母细胞快速升温解冻并使其复苏；再将已解冻复苏的该人卵母细胞放入序贯培养液中，置入37±0.2℃、5％～6％二氧化碳浓度的孵箱内进行复苏后培养，以供体外受精；其特征在于所述方法包括下列具体操作步骤：A、冷冻预处理：取卵之后，先经2-3小时的孵育，去除人卵母细胞周围卵丘组织，再将该人卵母细胞放在冷冻保护液里进行冷冻处理；B、程序降温冷冻和低温贮存：将预处理后的人卵母细胞装入麦管中，放入程序冷冻仪中，进行程序化缓慢降温冷冻；当温度达到设定的低温值时，并稳定10-20分钟之后，将该人卵母细胞移入液氮中低温贮存，以供复苏备用；C、快速升温解冻：从液氮中取出贮存有该人卵母细胞的麦管，先后放在室温空气中和30±3℃的水中，使之迅速升温；再将麦管擦干、剪开，取出该人卵母细胞，再顺序地放入不同的解冻复苏处理液中复苏；D、复苏后培养：将已解冻复苏的该人卵母细胞放入序贯培养液中，置入37±0.2℃、5％～6％CO2浓度孵箱内进行培养，以供体外受精。