[发明专利]饮用水生物处理的TTC－脱氢酶活性测定方法

摘要

饮用水生物处理的TTC－脱氢酶活性测定方法，它涉及一种环境监测方法，特别是一种对饮用水生物处理中的生物活性进行测定的方法。目前，测定污水生物处理中的生物活性方法，由于萃取时溶剂蒸发，极易破塞而溢，从而导致测定结果不稳定，使得这一生化分析技术在实际应用方面受到限制。本发明方法包括如下操作步骤：a.样品的采集与制备，b.样品浓缩，c.样品培养，d.终止酶反应，e.比色分析。本发明的方法解决了检测尺度和低基质浓度条件下的生物活性检测问题，它的检测结果稳定，具有极高的实用价值，利于推广应用。

主权项

1.一种饮用水生物处理的TTC-脱氢酶活性测定方法，其特征在于它包括如下操作步骤：a.样品的采集与制备：取待处理水样10～15g放入含有50～100mL无菌水的三角瓶中，加盖无菌棉塞，扎紧后置于振荡器上振荡60min，振荡频率240次/min，所得生物膜混合液便可作为TTC-DHA活性测定的样品；b.样品浓缩：将a步骤待测样品转移到100mL离心管内，以4000r/min的速度离心10min，静止后，弃去上清液，将沉淀物用10mL蒸馏水洗入25mL比色管中，再依次加入7.5mL Tris-HCl缓冲液，pH＝8.4；2.5mL体积浓度0.36％的Na2SO3溶液；2.5mL体积浓度0.4％的TTC溶液和2.5mL蒸馏水，混合均匀后，立即从上述混合液中吸取5mL注入具塞试管中，并加入0.5mL甲醛溶液，作为对照样品；c.样品培养：将25mL比色管连同样品对照管一起置36～38℃恒温水浴振荡培养箱内培养2～4h；d.终止酶反应：分别向25ml比色管和对照管中加入2.0mL甲醛溶液，混合均匀，并将25ml比色管内的溶液分装于4个具塞试管中，再连同样品对照管一道离心5min，弃去上清液；e.比色分析：向上述试管中各加入5.0mL丙酮，并将试管底部沉淀物搅拌混合均匀，于36～38℃恒温水浴振荡培养箱中保持10min，然后于4000r/min条件下离心5min，取上清液，在1cm比色皿的485nm处进行比色，记录吸光值，然后根据通常方法即可检测出样品的TTC一脱氢酶活性。