[发明专利]能降解秸秆类纤维素细菌的分离方法无效

专利信息
申请号: 200410043862.9 申请日: 2004-09-10
公开(公告)号: CN1597929A 公开(公告)日: 2005-03-23
发明(设计)人: 马放;任南琪;吴波;远立江 申请(专利权)人: 哈尔滨益生环境技术有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20
代理公司: 哈尔滨市松花江专利商标事务所 代理人: 单军
地址: 150078黑龙江省*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 能降解秸秆类纤维素细菌的分离方法,它涉及一种从土壤中分离秸秆类纤维素降解菌中细菌的方法。本发明是这样实现的:a.将赫奇逊无机盐固体培养基倒在无菌平皿中,待培养基凝固后在上面放一张灭菌后的草纸,然后用移液管吸取赫奇逊无机盐液体培养基润湿草纸,取筛好的土粒进行点种,点种后放培养箱中保湿培养,采用平板划线法分离和纯化菌苔;b.把菌苔放入含有玻璃珠的生理盐水中,进行无菌稀释,吸取稀释菌液到赫奇逊无机盐平板上摇匀后,在平板上加盖一张无菌滤纸,保湿培养;c.将初筛分离的单株菌分别接入三角瓶中进行液体发酵实验,从中选出产糖量相对高的菌。本发明可以高效率筛选出降解纤维素的细菌,它具有工艺简单、成本低的优点。
搜索关键词: 降解 秸秆 纤维素 细菌 分离 方法
【主权项】:
1、能降解秸秆类纤维素细菌的分离方法,其特征在于它是这样实现的:a、富集驯化:将赫奇逊无机盐固体培养基倒在无菌平皿中,待培养基凝固后在上面放一张灭菌后的草纸,然后用无菌移液管吸取赫奇逊无机盐液体培养基润湿草纸,取筛好的土粒进行点种,点种后放培养箱中30℃~50℃保湿培养6~7天,从出现透明圈的土粒周围挑取菌苔,采用平板划线法分离和纯化菌苔;b、初筛:把上述被纯化的菌苔放入含有玻璃珠的生理盐水中,在120~160转的摇床上摇2~5个小时,然后进行无菌稀释,稀释到1~10个菌/ml,吸取稀释菌液到赫奇逊无机盐平板上摇匀后,在平板上加盖一张无菌滤纸,30℃~50℃保湿培养5~7天,长出的菌落再进行稀释培养2~3次;c、复筛:称取1~2g羧甲基纤维素、100~200ml赫奇逊无机盐液体培养基加入三角瓶中,调pH=7.0~7.5,在120~130℃灭菌10~20min,将初筛分离的单株菌分别接入三角瓶中进行液体发酵实验,每天测其产糖量变化,跟踪10天,从中选出产糖量相对高的菌。
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