[发明专利]Y染色体细微缺失诊断试剂和对其进行PCR扩增的方法

摘要

Y染色体细微缺失诊断试剂和对其进行PCR扩增的方法，它涉及一种用于诊断Y染色体细微缺失的试剂和对该试剂进行PCR扩增的方法。本发明的试剂由下述成分制成：(1)用pH=7～8的TE分别溶解引物干粉，制成10pmol/μl的溶液；(2)在24μl反应体系中分别加入如下成分：sY87－F、sY87－R、sY143－F、sY143－R、ex2DAZ－F、ex2DAZ－R、RhEY－F、RhEY－R、10x缓冲液、MgCl₂、dNTPs、Taq酶，对其进行PCR扩增的方法为：向试剂内加入DNA样本，在94℃对Y染色体细微缺失诊断试剂进行预变性8分钟；然后分别在94℃、50℃、72℃各变性1分钟；共循环32次，最后将试剂冷却至15℃。本发明具有检验稳定、灵敏、快速的优点，实验成本仅为国外相关试剂盒价格的十分之一。

主权项

1、Y染色体细微缺失诊断试剂，其特征在于它由下述成分制成：(1)用pH＝7～8的TE分别溶解下列引物干粉：sY87-F、sY87-R、sY143-R、ex2DAZ-F、ex2DAZ-R、RhEY-F、RhEY-R，分别制成10pmol/μl的sY87-F、sY87-R、sY143-R、ex2DAZ-F、ex2DAZ-R、RhEY-F、RhEY-R溶液；(2)在24μl反应体系中分别加入如下成分：0.2μl sY87-F、0.2μl sY87-R、0.175μl sY143-F、0.175μl sY143-R、0.1μl ex2DAZ-F、0.1μl ex2DAZ-R、0.075μl RhEY-F、0.075μlRhEY-R、2.5μl 10x缓冲液、25mM 1.5μl MgCl2溶液、混合的dNTPs溶液2μl，加dH2O至24μl，此外，每个反应体系中加入0.125μl250U的Taq酶。