[发明专利]从水母中分离的具有抗氧化活性的蛋白及其应用

摘要

本发明涉及海洋生物，具体讲是两类具有抗氧化活性的水母蛋白，其分离步骤为，水母绞碎细胞破碎后，加入磷酸缓冲溶液中，2－6℃浸泡0.5－2h；转速10000－20000rpm，离心10－30min，取上清液；磷酸缓冲溶液二次浸取，转速10000－20000rpm，离心10－30min；合并两次离心的上清液；用凝胶过滤层析法，将合并的上清液分离，得到两类水母蛋白；它们能够抑制超氧阴离子自由基(O^2－)、羟自由基(OH)的产生，防止红细胞因过氧化氢氧化溶血和肝脂质过氧化；属于天然抗氧化剂，抗氧化活性高，对人、畜无毒害；同时，本发明利用了水母海洋生物资源丰富，为其低值资源获得高值化发展提供了新途径。

主权项

1.从水母中分离的具有抗氧化活性的蛋白，其特征在于：其分离步骤为，1)将称量的水母均匀绞碎后，细胞破碎，加入0.5-5倍的重量/体积比的磷酸缓冲溶液中，放入2-6℃下，浸泡0.5-2h；2)在4℃下，转速10000-20000rpm，离心10-30min，取上清液；残渣用0.5-3倍的重量/体积比的磷酸缓冲溶液二次浸取，在4℃下，浸泡0.5-2h；再在4℃下，转速10000-20000rpm，离心10-30min；合并两次离心的上清液；3)用凝胶过滤层析法，将2)中的合并的上清液分离，得到两类水母蛋白；第一类蛋白的分子量大于800K，等电点PI在3-9，于百分饱和度30-60％的硫酸铵溶液中沉淀；蛋白质量百分组成：天门冬氨酸7.61％，苏氨酸4.12％，丝氨酸2.52％，色氨酸3.23％，谷氨酸13.29％，甘氨酸13.09％，丙氨酸5.35％，胱氨酸11.00％，缬氨酸5.23％，蛋氨酸3.85％，异亮氨酸3.06％，亮氨酸3.85％，酪氨酸2.06，苯丙氨酸4.19％，赖氨酸4.19％，组氨酸0.50％，精氨酸6.02％，脯氨酸5.78％，总氨基酸98.94％；第二类蛋白的分子量小于30K，等电点PI在4-8，于百分饱和度0-30％的硫酸铵溶液中沉淀；蛋白质量百分组成：天门冬氨酸8.43％，苏氨酸3.89％，丝氨酸2.62％，色氨酸3.43％，谷氨酸13.15％，甘氨酸12.18％，丙氨酸4.86％，胱氨酸11.18％，缬氨酸4.99％，蛋氨酸3.89％，异亮氨酸3.11％，亮氨酸3.82％，酪氨酸2.07％，苯丙氨酸4.12％，赖氨酸4.20％，组氨酸0.65％，精氨酸6.09％，脯氨酸6.09％，总氨基酸98.77％。