[发明专利]人头皮毛乳头分离方法

摘要

一种头皮毛乳头分离方法，包括以下主要步骤：将头皮标本在真皮－皮下组织交界处剪开；将皮下脂肪层反复剪碎至肉泥状；加入含胶原酶I的DMEM液，在常温下进行消化，使皮鞘变得松散但仍能包裹住毛乳头；用吸管反复吸取培养皿中的液体然后重新将它们排挤到培养皿中，由此产生震动、冲击，使毛乳头游离出来；最后捡拾出毛乳头。本发明不需要在显微镜下进行高难度的手工精细操作，无需特殊训练即可掌握，在显微镜下工作的时间短，污染机会小。

主权项

1、一种头皮毛乳头分离方法，其特征在于依次包括以下主要步骤：①、取无菌处理后的头皮标本，在真皮-皮下组织交界处剪开，使毛囊中下部保留在皮下脂肪层，并彻底剔除残余在皮下脂肪中的真皮层；②、将皮下脂肪层置于器皿中，反复剪碎至肉泥状；③、在器皿中加入2-5倍体积的含胶原酶I(浓度为1-3mg/ml)的DMEM液，在35℃-37℃温度下进行消化，至显微镜下观测到真皮鞘变得松散但仍能包裹住毛乳头；④、用吸管吸取器皿中的液体后重新将它们排挤到器皿中，如此反复多次，使消化后的毛囊中下部在此过程中不断受到冲击、震动，由此帮助毛乳头游离出来；⑤、向上述液体中加入DMEM液进行稀释；⑥、将上述稀释后的液体转入到试管中，混匀，静置若干秒，使毛乳头及游离细胞在浮力作用下悬浮于上清液中，至肉眼见大块组织沉淀于试管底部；⑦、将上清液吸出、收集；⑧、用微吸管在显微镜下从上清液中捡拾出毛乳头。