[发明专利]脑缺血再灌注损伤动物模型的制作方法

摘要

本发明公开了一种脑缺血再灌注损伤动物模型的制作方法，提供了一种模型稳定且可重复性强，方法简单易控的脑缺血再灌注损伤动物模型的制作方法，本发明的方法同时可定量分析一种治疗脑栓塞方法的疗效和安全性，便于统计学处理，还可用于做病理形态学对比和分子生物学研究，本发明的方法是通过结扎动物颈总动脉，向颈内动脉注射入血栓，先造成动物不同程度的脑缺血损伤，然后重新开放颈总动脉，造成缺血后再灌注损伤，从而造成动物脑栓塞。

主权项

1、一种脑缺血再灌注损伤动物模型的制作方法，其特征在于通过结扎动物颈总动脉，向颈内动脉注射入血栓，先造成动物不同程度的脑缺血损伤，然后重新开放颈总动脉，造成缺血后再灌注损伤，从而造成动物脑栓塞；其主要步骤如下：(1)麻醉动物和颈动脉手术将动物麻醉，手术暴露右侧颈总动脉与颈内外动脉的分叉，用一塑料软管结扎颈外动脉，将一注满肝素盐水的导管向向心端插入颈外动脉并固定，缝合皮肤，将导管口留在皮外，动物苏醒三小时后可用于栓塞；(2)制备血栓从正常动物动脉抽取新鲜血放在玻璃试管中，37℃条件下水浴2小时，将凝血块移入重量百分比为0.1％牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐水中，用搅拌器将凝血栓打碎，悬液分别通过滤网，最后将网上遗留的血栓用重量百分比为0.1％牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐水液冲下，称重，制成悬液，加入放射性标记的微量元素；(3)注射血栓造成脑栓塞用一次性注射器抽取两个等量1mL的血栓悬液，一个注射入步骤(1)中手术苏醒三小时后留在动物颈外动脉的导管内，另一个留着用于秤重和测量总放射性；(4)麻醉动物，再开放颈动脉和脑内血流将动物再次麻醉，取走颈外动脉上的软管，使颈内动脉血流通畅；(5)行为学评分观察动物行为变化，通常动物会出现眼球震颤、公济失调、运动障碍、昏迷或死亡等一系列神经功能损害的表现，按照表现不同，分为正常组和不正常组；(6)血栓定量将动物处死，取出脑组织，测定放射性，该放射性与1mL血栓悬液总放射性的分数与栓塞量的乘积即为该动物实际被注射的血栓量。