[发明专利]5'－核苷酸酶活性测定方法及5'－核苷酸酶诊断试剂盒

摘要

本发明涉及一种测定5′－核苷酸酶活性的方法，同时本发明还涉及5′－核苷酸酶诊断试剂盒，属于医学检验测定技术领域。该试剂盒包括缓冲液、肌苷单磷酸、腺苷三磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸、还原型辅酶、肌苷激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、稳定剂，通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生酶偶联反应，再将最终反应物置于生化分析仪下，检测主波长吸光度变化的情况(速度)，从而测算出5′－核苷酸酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果，并且灵敏度高、精确度好，不受内外源物质的污染，便于推广应用。

主权项

1.一种5′-核苷酸酶活性测定方法，步骤如下：1)、将样品与主要由腺苷三磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸、还原型辅酶、肌苷激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶组成的试剂混合，使之发生如下原理的反应：肌苷单磷酸+水5′-核苷酸酶肌苷+单磷酸腺苷三磷酸+肌苷肌苷激酶腺苷二磷酸+肌苷单磷酸腺苷二磷酸+磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸激酶腺苷三磷酸 +丙酮酸丙酮酸+还原型辅酶乳酸脱氢酶乳酸+氧化型辅酶2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度下降的速度，测算出5′-核苷酸酶的活性大小。